2.免疫组化的核心原理包括酶标记、荧光和胶体金等。为了有效解决实验中常见的问题，如无染色、高背景和非特异性染色，需要精确匹配试剂、优化孵育条件以及改进预处理工艺。3.取材与固定是免疫组化实验的基础步骤，必须选择适当的材料并确保固定液的温度控制在37℃过夜或60℃ 1-2小时，以防止样本脱落。4.脱蜡过程需要耐心，使用二甲苯分三次处理，每次10分钟，然后逐渐降至70%酒精。内源性过氧化酶的抑制是关键步骤，通常使用3%H2O2处理，同时用0.5%高碘酸处理气泡。5.抗原修复是确保目标蛋白有效暴露的重要步骤，可以选择酶、高压热或微波热修复，使用柠檬酸盐或EDTA修复液。