2.在引物退火之后，新合成的链方向为5&#39；到3&#39。3.PCR所用的酶具有一项特性，即只有在检测到上一个核苷酸配对完成之后，才能继续向下延伸。因此，只要引物的3&#39；端碱基能够与DNA单链配对，无论5&#39；端是否经过修饰，延伸过程都能够顺利进行。4.PCR引物并不需要与模板完全互补，只要3&#39；端的几个碱基能够配对，就可以触发反应。5.在PCR的第一个循环完成后，由上游引物扩增出来的链会与下游引物结合，这意味着即使引物经过了修饰，其修饰位点同样可以被扩增。以上内容应能对您有所帮助。