专题文章
时长:00:00更新时间:2024-10-06 05:51:56
Bradford法,也称考马斯亮蓝法,是通过蛋白质与考马斯亮蓝结合后产生的颜色变化来测定蛋白质含量。其基本原理是,亮蓝在电离状态下显示棕红色,与蛋白质结合后变为蓝色,吸收光峰在595nm处,吸光值与蛋白质含量成正比。反应快速,通常在2分钟内达到平衡,且试剂制备简单,操作简便,灵敏度高,是微克级蛋白质测定的理想选择。然而,这种方法并非无懈可击。特殊蛋白的结构和缓冲液中的干扰物质可能会对测定结果产生影响。比如,对于特定的小分子碱性多肽如核糖核酸酶或溶菌酶,以及去污剂浓度超过0.2%的情况,如TritonX-100、SDS、NP-40等,Bradford法可能无法提供准确的定量。因此,实施时需确保样本的特性和实验条件符合该方法的要求。
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