分居期间可以主张不直接抚养子女一方支付抚养费。父母对子女的抚养义务不会因为夫妻分居而中断，在分居期间仍应当尽抚养义务，支付抚养费的数额和方式以及支付的时间由夫妻双方协商解决。一、如果夫妻分居期间孩子抚养费应该由谁负责。如果夫妻分居期间孩子抚养费应该由孩子的父母双方来承担，因为抚养子女是父母的法定义务，无论父母是分居还是离婚了，都要承担抚养的义务和职责，父母不履行抚养义务的，未成年子女或者不能生活的成年子女，有要求父母给付抚养费的权利。二、未离婚，可以起诉要孩子抚养费吗。未离婚，父母双方或者一方拒不履行抚养子女义务，可以起诉要抚养费。何谓不履行抚养义务？首先我们必须明确抚养义务与抚养费绝不能等同。夫妻双方分居期间，一方未支付抚养费并不必然意味着其未履行抚养义务。