2.在PCR过程中，关键的要素包括：DNA模板、引物、耐热DNA聚合酶、缓冲液和四种脱氧核糖核苷酸。3.引物的设计是PCR成功的关键因素之一。常用的引物设计软件有PRIMER5.0和OLIGO6。设计时需确保引物的特异性，避免产生二级结构，控制引物长度和碱基分布，并防止引物之间形成互补序列或发卡结构，同时避免产生二聚体。4.实验中应根据引物的退火温度和预期产物的长度来选择合适的反应条件和循环次数。5.Mg2+浓度、dNTP浓度、模板DNA浓度和酶浓度等参数应根据所使用的酶的说明书来确定，并根据实验经验进行适当的调整。