专题文章
时长:00:00更新时间:2024-12-15 06:55:20
IPTG诱导蛋白表达的原理和实验步骤。一、原理;IPTG是一种广泛应用的化学诱导剂,用于原核表达系统中的蛋白表达诱导。在原核表达系统中,如大肠杆菌中的重组蛋白表达通常受到某个特定基因启动子的控制。这个启动子通常是一个可调控的启动子,如乳糖操纵子。在没有诱导物存在的情况下,这些基因不会表达或表达量很低。而IPTG作为一种类似乳糖的分子,可以与操纵子结合,从而激活相关基因的转录和翻译,进而促使重组蛋白的表达。二、实验步骤;1.转化与涂板:将构建好的重组表达载体转化到适当的宿主细胞中,并在含有相应抗生素的选择性培养基上涂布均匀。2.培养和接种:从培养基上挑选单菌落接种至液体培养基中,在适当温度和摇床转速下培养至对数生长期。
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