现代技术的进展使得实时荧光定量PCR成为了可能。在这一过程中，每次循环结束后，荧光强度都会被记录下来。这种实时监测不仅提供了对扩增过程的直观理解，还允许科学家根据荧光信号的变化来判断扩增效率。当使用荧光定量PCR时，实验设计至关重要。首先，需要选择合适的引物和探针，这些分子能够特异性地与目标DNA序列结合。其次，必须优化反应条件，包括PCR缓冲液、Mg2+浓度以及酶的浓度，以确保高效的扩增。荧光定量PCR的一个关键优势在于其能够对原始DNA样品进行定量分析。通过设定阈值循环数，科学家可以确定扩增产物达到一定水平所需的循环次数。这一信息可用于计算原始样品中的目标DNA浓度。