细胞培养开始前的准备工作

了解相关概念、方法，记住操作过程，观摩、参与实际操作。参考书《动物细胞培养-基本技术指南》（科学出版社）。

2.掌握无菌技术。

高压消毒实验用品：操作台上不是一次性的物品均需做灭菌处理，无法高压的物品应使用75%酒精消毒。

消毒操作间和操作台：使用75%酒精擦拭无菌间的墙面、地面，操作台的台面，孵箱，离心机等。操作前须用紫外线照射无菌间和操作台30分钟消毒。入无菌间须穿隔离服，戴手套、口罩、帽子。用75%酒精洗去手套上的滑石粉。

无菌操作：操作时应尽量接近酒精灯；拿取吸管时，避免接触其使用端；不要在开口器皿的上方操作；吸取不同液体应更换吸管。不能碰瓶口。万一碰到，更换吸管。

二、细胞引进/订购：

1.根据实验目的和要求选择实验细胞：细胞培养已广泛应用于各个生物学、医学实验室及治疗和生产上。应根据自身实验的特性、要求，充分文献学习，了解细胞的特性，选择可以使用的细胞范围。并与导师沟通后，决定所需细胞。充分了解目前对实验用细胞质量的要求。

2.预定细胞：咨询舜冉生物细胞销售中心（舜冉细胞资源中心细胞服务），详细了解细胞的详细情况，如培养基种类、代次、价格等。预定细胞时间一般为实验前的1-2周。需提供细胞名称（英文缩写）、订购人的姓名、、单位。

三、细胞培养用品的准备：

1无菌服装：包括消毒隔离服（有条件的实验室）或工作服（如白大褂）、无菌手套、无菌帽和口罩。除隔离服外，其他物品为一次性使用。

2.操作台：有条件的实验室可装备超净培养间，超净工作台和生物安全柜也可。所有物品除一次性物品外均需高压灭菌。有酒精灯及95%酒精、吸管或（头）、洗耳球、或电动移液器、小试管及试管架、培养瓶架、离心管、培养皿或培养瓶、计数板、废液缸。

3.仪器设备：相差显微镜、离心机、冰箱、水浴锅、无菌车及架子、废物桶、marker笔、灭菌擦手纸、75%酒精喷壶。

4.培养用液：PBS或D-hanks、胰酶等消化液（一般为0.05%或0.25%）、培养基（常用的有DMEM、R10、MEM、F12、L15等）、血清（胎牛、小牛、马等）、生长因子、药物。培养用液需提前向公司订购，或咨询舜冉生物细胞销售中心制剂服务（）。这些培养用液都有商业供应，不建议购买粉剂自己制备液体。

5.其他实验相关用品。一些非常规特殊用途的添加成分或实验用品，须向公司订购，因寄送有一定滞后性，建议在订细胞之前购买。

舜冉（上海）生物科技有限公司更多人AB血清、进口血清、国产血清，豚鼠血清、兔血清、绵羊血清、山羊血清、封闭驴血清、大鼠血清、小鼠血清，8000多种细胞株，atcc原代细胞，培养基，抗体，胰酶，试剂盒，各类试剂等