实习报告 (2)

食品质量与安全（111）班：洪建新  学号：2302110107

指导老师：丁志刚

摘要：给动物经口灌胃三氯化铬，结果大鼠蓄积系数大于５．３，为弱蓄积毒性，小鼠微核实验阴性；精子畸形实验有明显剂量反应关系，三氯化铬给药量达１２１．８ｍｇ／ｋｇ时，畸形率有显著性增高，提示三氯化铬具有生殖毒性。

关键词：三氯化铬  急性毒性  小鼠  LD50

1、前言

三氯化铬是紫色片状晶体，铬离子处于六人上氯离子形成的八面体空隙中熔点是83℃ ，相对密度是1.76 g／cm³溶于水、乙醇，微溶于丙酮，不溶于乙醚。三氯化铬是合成其它铬盐的重要原料，在无机合成和有机合成中有重要的作用，是合成饲料添加剂的主要成份，工业上主要用作媒染剂及催化剂

二、材料与方法

（一）、材料

昆明种小鼠 16只（原则上雌雄各半）、小鼠笼、小鼠食物和水。

（二）、仪器与试剂

仪器：灌胃针，酒精棉，25ml容量瓶6个，烧杯,10ml及1ml刻度吸管若干，电子天平，镊子等

试剂：三氯化铬    蒸馏水

（三）、试验方法

1、受试动物的选择及分组：

选取16只健康昆明小鼠，一般为雌雄各半，实验动物要在实验室环境中至少适应几天，并且在染毒之前，禁止喂食。

对16只小鼠进行称重，分为四组，每组四只小鼠，四只小鼠的质量要差不多重，如果不是要进行调换，并对每组小鼠进行编号，其中编号：头（1）、前脚（2）、腹部（3）、后脚（4），将标记好的小鼠置于同一笼中喂养。（重量可见表1.1）

2、采用方法：

霍恩氏法：1、设立四个剂量组。

2、每个剂量组的动物数相等，一般为4只。

3、各剂量关系成倍数关系。

                        表1.1

经查阅资料，可知三氯化铬对小鼠经口灌胃染毒LD50为2143.3mg/kg，该实验组分为四组，按2.15倍剂量系列，则试验剂量为：0.4g/kg、1.00g/kg、2.15g/kg、4.g/kg。（备注：将查阅相关资料得到的三氯化铬LD50值安排在第二组与第三组之间）

4、药液配制：

本实验采用2%容积灌胃（10g体重灌0.2ml）,最高剂量组即第四组（4.g/kg）,应配的试剂浓度为c=40mg/kg÷20ml/kg=232mg/ml

试剂配制：求c液所需溶质的质量m

根据公式

    式中：m—所需溶质量（本实验为三氯化铬）

    c—所配浓度(232mg/ml)    

         L—所配溶液量（25ml）

        d—溶质相对密度（三氯化铬为1）

采用固定体积稀释法，按求得的m称取CrCl3  5.8g置于25ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度，溶解混匀得到剂量4；取剂量4溶液11.63ml于25ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度混匀后得到剂量3；取剂量3溶液11.63ml于25ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度混匀后得到剂量2；取剂量2溶液11.63ml于25ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度混匀后得到剂量1。

计算每只动物实际灌胃量

     计算每只动物实际灌胃量=0.02ml/g×该鼠体重g

5、灌胃

空腹时灌入，灌胃后3—4h再喂食，排除人为误差，所有小鼠均由一人灌胃染毒。每次灌胃0.4ml。且在开始灌胃的同时就记录时间，观察在灌胃后的两个小时内是否有小鼠急性中毒死亡，若有，则解剖，分析其死亡原因，是中毒死亡，还是实验操作不当死亡。

（四）监测/检测指标

观察小鼠的毛色光亮、行动敏捷、精神状态、健康活泼、生理变化、死亡情况及出现的不良反应现象。（见表5.1）

表   5.1

（一）、试验结果

经过五天的实验观察，记录小鼠的状况如下：第一组小鼠行为活跃，精力充沛，皮毛粗糙无光泽，无死亡情况，体重有稍微下降后逐渐回升；第二组小鼠死亡三只，剩余22号小鼠活动正常，皮毛粗糙无光泽，第三组小鼠死亡三只，剩余33号小鼠行动稍微有些缓慢，皮毛粗糙无光泽，第四组小鼠全部死亡。另外小鼠的中毒症状表现为精神萎靡，食欲不正，行动缓慢，抽搐打颤。死亡的小鼠解剖后出现胃充盈肿大且呈靛蓝色，其他器官无异常现象，皮毛粗糙无光泽，全身发青的症状。

（二）、结果分析

    我们一共给小鼠观察了好几天，死亡的结果是0、3、3、4，通过分析我们总结了一下几点原因：1、在灌胃的时候操作不当，导致药剂没能完全灌入胃中，2、天气太冷，导致环境对实验结果有所影响。通过查阅霍恩法LD50计算用表可得出经口灌胃染毒时三氯化铬的LD50为1.00×103mg/kg，它的95%可信限为（0.581-1.72）×103

结论：初步推断出三氯化铬对小鼠运动和皮肤有明显影响。三氯化铬在我国食品毒理学中外来化学物经口毒性分级中属3级，低毒。

参考文献：

[1]：http://www.baike.com/wiki/

[2]食品伙伴网：http://www.foodmate.net/

[3]王向东，良忠《食品毒理学》[M].南京；南大学出版社,2007

[4]李建科主编，食品毒理学，中国计量出版社。

[5]王彦波,韩剑众《食品毒理学》的教学改革与实践[J].现代食品科技,2007