
最可靠的判断怀孕时间的方法:只合笼一天,然后彻底分开
怀上了,就是那天;没怀上,重复第一步
这个方法就是比较费时,但时间绝对准
我也不止一次碰到过见栓后没有胚胎的情况。估计要么是雄鼠可以交配但是精子活力不行,要么是雌鼠卵子有问题,不好确定。早晨检栓后把雌雄分开,傍晚再合笼的方法应该是可以让见栓时间更准确的,精栓也更明显。如果一直合笼,见栓时间变化范围较大。
你好楼主,我做过很长时间的小鼠试验,知道这些
检查阴栓就是在交配后(公母鼠同笼)第二天早上,尽量早,一定不要超过10点,将母鼠拿出来,用大镊子将母鼠尾根反过来,观察阴道部位,如果交配了,就会在母鼠阴道口留下白色的公鼠精液,一般鼠在半夜交配,早上起来检查时精液结固,呈白色或黄色黏附在阴道口,这就是阴栓。
1. 如果不做超排的话,要选处于发情期的雌鼠(阴道胀大、发红、阴道口打开、稍微有点湿润)和公鼠同笼,这样一般第二天早上就可以观察到阴栓。但是因为没做超排,不能控制发情,所以也可能第三天才能观察到。阴栓在同笼后的早上观察,可以很明显地看到阴道口被发白的膏状物堵住。
2. 虽然教科书上可以1:2同笼,但实践中感觉还是1:1比例比较好。一般是1公1母同笼,第二天捡栓后,公鼠最好休息2-3天,再去与母鼠交配同笼,这样精子活力较好利于受孕。
3. 不知道你要取什么时期的胚胎。同笼后第二天早晨如果有栓,此时为day 0,这时的胚胎是受精卵阶段,你要是第三天取胚胎,早上就是2-cell(day 1),如果晚上取就是4-cell胚胎,以此类推,8-cell(day 2),桑葚胚(day 3),囊胚(day 3.5)。
4. DPBS可以用于捡胚,如果胚胎要用于后续试验建议用补加BSA的HKSOM捡胚。取受精卵,撕开壶腹部就可以;2-cell到桑葚胚都是撕碎输卵管;取囊胚要冲子宫。
5. 稍微差不多的体视显微镜都可以观察胚胎,要是有好的带相差的就最舒服了。
看你的帖子应该是菜鸟了,最好找一个做胚胎的人带你一两次,这些都是最基本的操作,很容易学,但是要是自己摸索就太浪费时间了。
一般而言,比较大一点的老鼠雄性的睾丸还是比较明显的,这很容易区分。
对于比较小的,可以据以下方法:
1.看肛门与生殖器之间的距离:雄性隔得远,雌性隔得近。
2.雄性阴茎朝头的方向突出,可挤压包皮使其露出而确认。雌性较小时可见闭合的阴道口,挤压亦可张开。可以说,这个方法是最本质的,最能确认的。像兔、豚鼠等这些较难辨认雌雄的动物均可用此法。当然,看得多了,不用如此挤压,一眼就可看出来。将生殖器周围皮肤稍微用力往下挤压,可以分清柱状和缝状:前者雄,后者雌。
3.看乳头。
刚开始一定要认真仔细地观察,这样会有一些经验。熟悉以后,可以很迅速很准确的分出来。
4.脑下垂体和肾上腺:雌性的远大于雄性
5.肾脏鲍氏囊上皮(epithelium of Bowman's capsule in kidney):
雄性:立方上皮(cuboidal)
雌性:鳞状上皮(squamous)
另有模式图可见旧帖:
小鼠雌性的肛门和阴门之间一般有一无毛区,雄性的肛门和阴茎之间没有无毛区,性成熟后,阴茎比阴门明显的多。注意观察。很容易区分的。
雄性大鼠阴囊明显可见,性器与肛门间距离较远,二者间无毛;雌性成年大鼠,胸腹部明显可见五对乳头,特征是肛门距离生殖孔较近。小鼠雌雄辨认和大鼠的相同。
