塞曼效应石墨炉原子吸收光谱法直接测定乳汁铅

摘要：

[目的]探讨塞曼效应石墨炉原子吸收光谱法直接测定乳汁铅的方法.[方法]样品不用前处理,采用标准曲线法,用基体改进剂以1∶4稀释后直接进样测定,并进行了质量控制分析.[结果]方法的线性范围为(0～150)μg/L.批内精度(RSD%)在2.1～6.0之间,批间精度(RSD%)在5.8～8.1之间,特征浓度是1.0 μg/L,检出限:当3σ时是0.3μg/L,回收率在96.7%～103.9%之间.分析的血铅标准物质(SRM 955,美国标准物质局生产)值是(58.6±3.2)μg/L,与其参考值(57.0±5.0)μg/L比较,在误差范围内.[结论]方法灵敏、简单,准确度和精密度都符合要求

人奶中的铅可以转移到婴儿体内，随着中国工业化的发展，汽车和摩托车排气使得接触铅的人增加，包括孕妇。随着人类乳喂养率的增加婴儿受到更多的影响，所以人乳中铅含量的测定变得更加重要。有许多方法来确定人类乳汁中铅的含量。其中一些采用标样的方法，以及一些包括样品前处理，如干燥或湿消化。标准加入法需要大量的时间。预处理有一些缺点，例如样品可能被污染和丢失。

建议用已研发快速的直接测定乳铅方法：选择干燥，灰化的最佳温度，原子化和基体改进剂。

1材料和方法

1．1仪器

日立180-70原子吸收光谱仪与塞曼背景校正法（AAS）;日立180-0675石墨炉和自动采样器;日立180-7402石墨管和铅阴极灯，从日本购买法国Eppendorf公司的微滴管​​。

1.1.1原子吸收光谱法的操作条件

波长：283。3nm，狭缝宽度：1。为3nm，灯电流：7。5mA，信号模式：峰面积，氩气：99。999％，样本量：10L。

炉加热方案：干燥，60〜120℃，60秒;400℃灰化20秒;雾化，2000℃，7秒;清洗，2200℃，3秒。雾化气体流量为100（L /min）除零以外的所有上述步骤。

1.2试剂

1.2.1铅标准溶液

由上海气象科技研究所提供的铅储备标准溶液的9.98微克/毫升，解决方案用2.5％（V / V）逐渐稀释到标准工作的（1.0克/毫升）。

1.2.2血铅参考材料

血铅参考材料是由国家标准局（美国国家统计局）提供的SRM955。其参考值（57.±05.0）g / L。

1.2.3基体改进

基体改进剂是由0.5克柠檬酸，0.5毫升的双氧水，0.25克磷酸二氢铵。他们用双蒸水稀释至100ml。

1.2.4   2. 5％（V / V）

2. 5毫升浓用双蒸水稀释至100毫升。

以上所有的试剂，超纯级。

1.2.5双蒸水

整个实验过程中使用双蒸水是由石英蒸馏器具得到的。

1.3清洁

所有的塑料制品被浸泡在0.3％，24小时，然后用双蒸水冲洗，最后在无尘的环境中干燥。一些随机选择的塑料管，在确保他们没有被铅污染后方可使用。

1.4抽样

取生育4周后母亲在喂养2〜3小时后用奶抽2〜5毫升人乳，并在一个干净的平底塑料管，并储存于 - 20℃直到测定。

1.5绘制标准曲线

0.60毫升基质改性剂和20毫升均匀混合的人乳倒入7个1. 5毫升的塑料离心管。然后铅标准溶液（1。0克/毫升），0，0. 02，0. 04，0. 06，0. 08，0. 10，0. 15毫升分别加入0.20，0.18，0.16，0.14，0.12，0.10，0. 05毫升2. 50％的。每个管的总液量为1. 00毫升，不同的管铅浓度分别为0，20，40，60，80，100和150克/升。

在所有管的溶液是在一个旋涡混合器1分钟充分混合。在测定之前溶液需10秒振动再立即注入石墨炉。在绘制标准曲线中所准备的铅浓度高于牛奶中铅的浓度，与添加不同体积的铅标准溶液的样品和没有铅标准溶液的样品读数之间有差异。

1.6样品制备

在一个塑料管的0.20毫升混匀的人乳，然后加入0。60毫升基质改性剂和0。20毫升2。5％的，混合均匀。以同样的方式准备空白管。

1。7测定和计算

根据以上所述的程序和条件，对空白，标准铅溶液和牛奶样品进行了分析。样品空白校正后的吸光度乘以5，从标准曲线获得的牛奶样品的铅含量（μg / L）

2结果

2.1基体改进剂对吸收信号的影响

据1中所描述的步骤。是在0，25，50和75g / L时在设备操作条件下基体改进剂和双蒸水分别绘制两个铅标准曲线。结果表明：在图1。由基体改进剂制备的标准溶液的曲线斜率明显比双蒸馏水制备标准溶液高。有显著性差异（P <0.05）之间。

图1基质改性剂的吸收信号的影响

2.2石墨炉况的选择

同一制备样品与基体改进剂的条件下分别选取干燥，灰化和雾化。样品应该完全没有飞溅和干燥温度（60〜120）℃条件下干燥60秒的时间。吸光灰化温度低于350℃明显低于灰化温度高于350℃的温度。然而，当灰化温度高于350℃吸收没有显着增加。由于吸光度的稳定性和总背景消除，选温度400℃为最佳灰化温度。在选定的干燥，灰化及相同的样本条件下来确定雾化条件。选2000∀雾化为最佳的温度是由于此条件下吸收最大，重现性好。

2.3浓度对吸收信号的影响

灵敏度也受浓度的影响。这在2.5％（V / V）的时候灵敏度是最大（图2）。

图2浓度对吸收信号的影响

2.4线性范围和检测限

血铅水平低于150g/ L时呈线性关系，回归方程如下：

Y ^= 0.0053+0.003C，R = 0.999

在20次测定的SD值3倍基础上，检测限为0. 3g/L。

2. 5精密度测试

两个人奶样品，每个样品分别测定了9次和6次。对样品确定后第1，第2，第3，第5，第7和第14天进行测定。结果显示在表1。

2. 6精确度试验

2.6. 1恢复

用基体改进剂和2至5倍2.5％（V / V）对人乳和原料奶样品进行稀释。然后分别加入10μg / L和20 μg / L的标准溶液。恢复测试结果列于表2

2．6．2参考材料分析

以同样的方式在10个管制备SRM955血铅参考材料样品。每个样品测定二次.铅含量平均为（586±3.2）μg / L，与参考值（57.0±5.0）μg / L比较是在误差范围内。

2.7人奶的标准曲线斜率与铅原料奶的铅比较

人奶和原料奶样品是依照1中所描述制备的。每类5个，然后由原方法确定浓度。回归方程分别为^= 0.0053+0.003C和y^= 0.0056+0.00394C。之间的回归系数没有显著性差异（P> 0.05）。

2.8应用

导致，从上海119名非暴露妇女用该方法测定人奶铅的含量。 95％的上限为14. 2μg/ L，几何平均值为4.4μg/L，中间值为4.7μg/ L，接近5.0μg/ L，低于14.5μg/L，但高于0.5μg/L，并在指定范围内（1.9〜8.6,0〜56,0〜158μg/L。此外，导致暴露在上海电池厂12名女工同样原来的方法测定。几何平均数是52.8μg/L，这比非暴露妇女高12倍。

3讨论

如果没有乳汁未干式或湿式消化直接注射入石墨炉，复杂的基质会产生干扰。灰化温度较高会导致铅的损失而较低的温度下会导致更高的背景吸收。一些人们提出的预处理样品，以防止牛奶样品铅损失，同时消除或减少基质干扰，而其他人提出的使用]磷酸作为基体改进剂或加氧流量，以防止木炭堆积石墨管。在该方法的基体改进剂包括0.5％柠檬酸，0. 5％（V / V）过氧化氢，和0. 25％

磷酸二氢铵和较低灰化温度（400℃）。因此，样品在干燥步骤没有溅出，使得分析灵敏度高，和延长石墨管的寿命。

可用作为稀释剂，可消除干扰。关键的一点是酸的浓度。如果酸浓度过高，就会使石墨管损坏。然而，如果酸的浓度太低则干扰不能消除。通过比较，为测定奶样选择2.5％（V / V）。

对于用原子吸收光谱法生物样品铅含量的测定，各种基质的敏感性是不同的。标准曲线对应的某些基质应当用于牛奶样品的测定从而减少误差。通过比较，人奶和牛奶的标准曲线的斜率无显著性差异（P>0.05）。因此人奶和牛奶的标准曲线某些铅浓度范围内，可以互相替代。

将样品的吸光度受设备条件的影响，如炉内温度，电源，气体流量等。在每10个样品测定后，用质量控制样本为核定仪器条件的稳定性，同时在日常运作开始绘制标准曲线。因此可以保证测定的可靠性和质量控制。

塞曼效应石墨炉原子吸收光谱法直接测定牛奶中的铅是简单快速的.The的测定的标准参考物质是在允许的误差范围内。它可满足测定生物材料的要求。