
一、实验目的
1.明确亚盐在食品中的作用以及限量标准。
2.掌握盐酸萘乙二胺法测定食品中亚盐的原理、操作步骤、注意事项
二、实验原理
样品经沉淀蛋白质,除去脂肪后,在弱酸条件下盐与对氨基苯磺酸重氮化后,再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色的染料,与标准系列比较定量。
三、仪器
| 1.722分光光度计 | 若干,提前20min打开预热 |
| 2.组织绞碎机,菜刀,砧板 | 1-2套 |
| 3.50mL烧杯 500mL烧杯 3L大烧杯 | 2个/组 1个/组 2个 |
| 4.电炉 | 2个 |
| 5.托盘天平 | 1个/组 |
| 6.200mL容量瓶 500mL容量瓶 | 1个 1个/组 |
| 7.恒温水浴锅 | 1-2个 |
| 8.25mL具塞比色管 | 10个/组 |
| 9.滴管,漏斗,滤纸,吸小球, | 1个/组 |
| 10.玻璃棒,温度计,标记笔,标签纸 | 若干 |
1.亚铁溶液:称取106.0g亚铁[K4Fe6(CN)·3H2O]
| ,用水溶解后,稀释至1000mL。 | 分装,1瓶/大组 |
| 2.乙酸锌溶液:称取22.0g乙酸锌[Zn(CH3C00)2·2H20],加3 mL冰乙酸溶于水,并稀释至100mL。 | 分装,1瓶/大组 |
| 3、饱和硼砂溶液:称取5.0g硼酸钠(Na2B07·10H20),溶于100 mL热水中,冷却后备用。 | 分装,1瓶/大组 |
| 4、对氨基苯磺酸溶液(4g/L):称取0.4 g对氨基苯磺酸,溶于100 mL 20%的盐酸中,置棕色瓶中混匀,避光保存。 | 分装,1瓶/大组 |
| 5、盐酸萘乙二胺溶液(2g/L):称取0.2克盐酸萘乙二胺,溶于100毫升水中,避光保存。有致癌作用 | 分装,1瓶/大组 |
| 6、亚钠标准溶液(0.2g/L):精密称取0.1000g于硅胶干燥器中干燥24h的亚钠,加水溶解移入500ml容量瓶中,并稀释至刻度。此溶液每ml相当于200µg亚钠。 | 分装,1瓶/大组 |
| 7、亚钠标准使用液(0.2µg/mL):临用前,吸取亚钠标准溶液5.00毫升,置于200毫升容量瓶中,加水稀释至刻度,此溶液每毫升相当于5微克亚钠。 | 分装,1瓶/大组 |
| 8. 蒸馏水 | 1瓶/组 |
1、样品的处理:
(1)取样:取适量的火腿肠,放入搅碎机内搅碎。准确称取5.0克经绞碎、混匀的样品,置于50毫升烧杯中。
(2)沉淀蛋白质:
①加12.5mL硼砂饱和溶液,搅拌均匀,以70℃左右的水约300mL将样品洗入500mL容量瓶中,置沸水浴中加热15min,取出后冷却至室温。
②一面转动一面加入5毫升亚铁溶液,摇匀,再加入5mL乙酸锌溶液,以沉淀蛋白质,
(3)过滤:加水定容,放置0.5h,除去上层脂肪,清液用滤纸过滤,弃去初滤液30mL,滤液备用。
2 标准曲线的绘制
精密吸取0.00, 0.20, 0.40, 0.60, 0.80, 1.00, 1.50, 2.00, 2.50mL亚钠标准使用液(相当于0、1、2、3、5、7、10、12.5µg亚钠),分别置于50mL比色管中.各加2mL对氨基苯磺酸溶液(4g/L),混匀,静置3-5min后各加入1mL 0.2%盐酸萘乙二胺溶液,加水至刻度,混匀,静置15min,
以零管调节零点,于波长538nm处测吸光度A,绘制标准曲线。
3 试样的侧定
精密吸取按40.0mL样液于50mL比色管中。以下按标准曲线测定方法依次加入其它试剂。加水稀释至刻度,混匀,静置15min,以零管调节零点,于波长538nm处测吸光度A。
同时做试剂空白。
六、数据记录
| 管号 | 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 样液 |
| A538 |
按下式计算:
A
X = ——————— × 1000
v1
m × —— × 1000
V2
式 中 :
X — 试样中亚盐的含量, mg/kg;
V1— 测定时所取溶液体积,mL;
V2 — 试样处理液总体积,mL;
m — 试样质量,g;
A—试样测定液中亚盐的质量,µg;
部分食品中亚盐的限量标准(以NaNO2计)
品 名 限量标准 mg/kg
食盐(精盐)、牛乳粉 ≤2
香肠(腊肠)香肚、酱腌菜、广式腊 肉 ≤20
鲜肉类、鲜鱼类、粮食 ≤3
肉制品、火腿肠、灌肠类 ≤30
蔬菜 ≤4
其他肉类罐头、其他腌制罐头 ≤50
婴儿配方乳粉、鲜蛋类 ≤5
| 西式蒸煮、烟熏火腿及罐头、西式火腿罐头 ≤70 | 上层脂肪用滴管吸除。 结果保留小数点后2位有效数字。 |
