消毒与灭菌区别总结-打印版.

介绍几个基本概念

1．灭菌：应用物理或化学方法杀灭物体中所有的病原微生物、非病原微生物以及芽胞和霉菌孢子的方法。

2．消毒：应用物理或化学方法杀灭物体中的病原微生物，而对非病原微生物及芽胞，孢子不要求全部杀死。

3．防腐：应用物理或化学方法阻止和抑制微生物的生长繁殖的方法。 4．无菌操作法：防止或杜绝一切细菌进入动物体或其他物体的方法。

5．滤过除菌：液体或气体通过滤过作用除去其中所存在的细菌。一般用0.22微米滤膜，但不能除去病毒，霉形体及L 型细菌。 第一节 物理因素

⏹ 温度 ⏹ 干燥 ⏹ 渗透压 ⏹ 辐射 ⏹ 过滤

⏹ 其他物理因素 一、温度

（一）高温对微生物的影响

⏹ 高温对微生物有明显的致死作用，其主要原因是高温能使菌体蛋白质变性或凝固，

酶失去活性，核酸结构遭到破坏等，从而导致其死亡。 ⏹ 多数细菌，酵母菌和霉菌的营养细胞和病毒在50-65 ºＣ10 min可以致死。 ⏹ 细菌芽孢，在121 ºＣ下５－20min 才能致死， ⏹ 同种微生物老龄菌比幼菌耐热。 ⏹ 干热灭菌(dry heat sterilization 

烘烤灭菌法；实验室用干燥箱烘。一般是160℃2小时即可达到灭菌目的。

⏹ 湿热灭菌(mosist heatsterilization

在同温度下，湿热灭菌的效果比干热灭菌好；因为：

a 比干热更易使菌体蛋白凝固。 b 湿热穿透力强；

c 湿热可以释放大量潜热。 ⏹ 湿热灭菌法 A. 高压蒸汽灭菌法 B. 煮沸消毒法

C. 流通蒸汽消毒法 D. 间歇蒸汽灭菌法 E. 巴氏消毒法 A 、高压蒸汽灭菌法

是湿热灭菌中最好的方法，通常1.05kg/cm2,的压力下面（此时温度121ºＣ）处理15－30min 。要排冷空气，否则会形成假压力，虽然压力达到要求，温度却达不到相应温度，而影响灭菌效果。

B 、煮沸消毒法

物品在水中煮沸 15min ，可杀死所有营养细胞和一部分芽孢。 在水中加入１％的Ｎa2CO3 或２－５％的石碳酸效果更好。此法适合注射器和解剖用具的消毒。

C 、间歇灭菌法(fractional sterilization）

a 是用常压蒸汽反复几次进行灭菌的方法。

b 主要用于不宜高压灭菌的培养基，不耐热的药物和营养物等

c 方法是将待灭菌物品置于蒸锅内加热到沸腾维持15-30min 杀死营养细胞，取出冷却

后在37℃恒温培养24小时，使芽孢萌发，再用此法灭菌，反复三次，即可达到灭菌目的。

D 、巴氏消毒法(pasteurization

a 是食品（牛奶）酿造（啤酒）工业中常用的方法。

b 具体做法是63－65℃处理30min 或71～72℃度处理15 s,速冷却至10℃下。 c 这样即可杀死病原微生物。又不致损坏营养，可保留食品饮料原有风味。 d 为节省时间，又达到巴氏消毒的效果，现多用高温瞬时灭菌132℃下1-2 s。

（二）低温对微生物的影响

① 常温冰箱保存细菌和病毒：（细菌4～0℃；病毒－20℃～－70℃）。

② 低温保存食品应迅速冷冻，否则扰乱细胞胶体状态，使水分形成结晶，冰结晶还能

机械地刺伤菌体胞膜，胞壁。

③ 冷冻真空干燥法：采取迅速冷冻和抽真空除水原理；如冻干疫苗和冻干菌种。

二、干燥

水分是微生物的正常生命活动必不可少的。干燥会导致细胞失水而造成代谢停止以致死亡。

微生物的种类，环境条件，干燥的程度等均影响对微生物杀灭的效果。休眠孢子抗干燥能力也很强，在干燥条件下可长期不死，这一特性已用于菌种保藏，如用砂土管来保藏有孢子的菌种。

在日常生活中也常用烘干、晒干和熏干等方法来保存食物。

三、渗透压

细菌处于低渗液中，细胞会吸水膨胀乃至破裂，称胞浆压出。

细胞处于高渗液中会脱水，引起细胞质和细胞壁分离，称质壁分离，导致死亡。 等渗溶液对微生物生长有利 四、辐射

辐射是能量通过空间传递的一种物理现象。 可见光线

肉眼可见的光线是在红外线和紫外线之间，波长为400～800nm 。 日光

利用日光暴晒是常用的简易消毒方法，许多细菌繁殖体在日光直射下2h 很易死亡。 紫外线：波长200～300m 的紫外线具有杀菌作用

杀菌机理：干扰DNA 的复制与转录 特点：紫外线穿透力较弱

应用范围：不耐热物品的表面消毒

电离辐射：包括高速电子、x 射线和 γ 射线。

杀菌机理：产生游离基, 破坏DNA 。

应用范围：一次性医用塑料制品的消毒，食品的消毒不破坏其营养成分。 五、滤过除菌法

⏹ 滤菌器:用物理阻留的方法，将液体或空气中的

细菌除去, 以达到除菌目的。含有微细小孔<0.22微米, 只允许液体或气体通过，而大于孔径的细菌等颗粒不能通过。

⏹ 适用范围：血清、毒素、抗生素以及空气等的

除菌。

六 、其他物理因素

⏹ 超声波

超声波是由超声波发生器产生的，对细胞有破坏作用，能使大多数细胞裂解死亡。

⏹ 微波

微波是一种波长短而频率较高的电磁波。微波对微生物的杀菌作用，主要是由于微生物在微波电磁场作用下，吸收微波的能量而产生热效应所致。

第二节 化学因素

⏹ 各种消毒剂可按其作用水平分为3类：

（1）高效消毒剂：可以杀灭一切微生物，包括细菌繁殖体、细菌芽孢、结核杆菌、真菌和病毒等。这类消毒剂又称为灭菌剂。 如甲醛、戊二醛、过氧乙酸和环氧乙烷等。 （2）中效消毒剂 除细菌芽孢外，可杀灭各种微生物。如乙醇、酚、含氯消毒剂和碘消毒剂等。

（3）低效消毒剂 可杀灭细菌繁殖体、真菌和有囊膜病毒，但不能杀灭细菌芽孢、结核杆菌和无囊膜病毒。如新洁尔灭、洗必太等。 一、常用消毒剂的实用性能 见下表

消毒剂类别 名称 浓度(% 用途

重金属盐

红汞 2 皮肤、粘膜、小创面消毒 硫柳汞 0.01 生物制品防腐

氧化剂

高锰酸钾 0.1 皮肤、尿道、水果、蔬菜消毒 过氧化氢 3 皮肤、粘膜、创伤消毒 过氧乙酸

0.2～0.5 塑料、玻璃、人造纤维消毒 卤素类 碘液 2.5 皮肤消毒

醇类 乙醇 70～75 皮肤、体温计消毒

酚类

石炭酸 3～5 地面、器皿表面和排泄物消毒 来苏尔

3～5 同上、也常用于手及皮肤消毒

表面活性剂 新洁尔灭 0.1 手术器械消毒 酸碱类 生石灰 10～20 排泄物、地面消毒 染料

龙胆紫

2～4

表浅创伤消毒

二、影响消毒剂作用的因素

⏹ 消毒剂的性质

⏹ 消毒剂的浓度与作用时间 ⏹ 微生物的类型及数量 ⏹ 环境中有机物的存在 三、选择适当的消毒剂

⏹ 杀菌谱广、有效浓度低、作用快。

⏹ 性质稳定、易溶于水、不易受酸碱影响。 ⏹ 无腐蚀性、无毒；不易残留。 ⏹ 价格低、便于运输，可长期保存。

第三节 生物因素

⏹ 共生：两种或多种生物生活在一起时，彼此并不损害而相互有利，称为共生。 ⏹ 寄生：一种生物从另一种生物获得所需的营养，赖以为生，并对后者呈现伤害作用

者，称为寄生。

⏹ 拮抗：当两种微生物生活在一起时，一种微生物能抑制或杀死另一种微生物，此现

象称为拮抗。

⏹ 协同：两种或多种生物在同一环境中，互相协助，共同完成某种作用，而为其任何

一种所不能单独达到。

一、抗生素与细菌素 （一）抗生素

是某些微生物在代谢过程中产生的能抑制或杀灭其他微生物的一种化学物质。它主要来源于放线菌、某些真菌和细菌等。

⏹ 抗生素的作用机理： a. 干扰细菌细胞壁的合成 b. 影响细胞膜的通透性 c. 阻碍菌体蛋白质的合成 d. 改变核酸代谢 （二）细菌素

大肠杆菌产生的细菌素称大肠菌素；葡萄球菌产生的称葡萄球菌素；霍乱弧菌产生的称弧菌素等，每类细菌素又可分为不同的型别；细菌素仅对近缘细菌有作用。 1928年A.Fleming 发现青霉素

澳大利亚病理学家霍华德. 弗罗里与弗莱明1940提纯出青霉素。 共同获得1945年诺贝尔生理学和医学奖. 三、 噬菌体

病毒种类很多，根据病毒寄生的对象来分，有植物病毒、动物病毒和微生物病毒。 噬菌体：是病毒中的一种，一般把侵染细菌、放线菌的病毒叫噬菌体。（把侵染真菌的病毒叫噬真菌体）

噬菌体在自然界广泛存在，在1995年发表的ICTV 的病毒分类与命名第六次报告报道了4000余种，分别划归为49个病毒科.

据Bradley(1967归纳，噬菌体共有六类形态。 （一）噬菌体的形态结构与组成

1、组成：主要由蛋白质和核酸组成。

2、基本形态：蝌蚪形、微球形和纤丝形。

3、蝌蚪形噬菌体的构造 以大肠杆菌T4噬菌体为例

头部：廿面体对称结构，由蛋白质衣壳构成，内含一条DNA 。 颈部：薄盘状，附颈须。

尾鞘：长95nm, 衣壳粒螺旋对称；可伸缩。 尾髓:中空，DNA 可由此进入细胞。

基板: 六角形盘状物，其上有刺突、尾丝。 刺突: 有吸附功能。

尾丝: 有识别吸附功能。

大肠杆菌T4噬菌体构造 （二）、噬菌体(phage的繁殖

噬菌体并没有个体的生长过程，而只有其基本成分的合成和装配，即首先将各个部件合成出来，然后装配，所以一般将噬菌体的繁殖称做复制。 根据噬菌体与宿主的关系：

烈性噬菌体：指感染宿主细胞后，能够使宿主细胞裂解的噬菌体. 温和噬菌体（或溶源性噬菌体）：噬菌体感染细胞后，将其核酸整合（附着）到宿主的核DNA 上，并且可以随宿主DNA 的复制而进行同步复制，在一般情况下，不引起寄主细胞裂解的噬菌体。

1、烈性噬菌体的繁殖

烈性噬菌体的繁殖过程一般分为五个阶段： 即吸附、侵入、复制、装配和释放。