
| 蛋白质电泳相关试剂及缓冲液 |
| 30%(W/V)丙烯酰胺溶液 ﹡组分浓度 30%(W/V) Acrylamide ﹡配制量 100ml ﹡配制方法 : 1.称取下列试剂,置于250ml烧杯中。 Acrylamide 29g BIS 1g 2.向烧杯中加入约80ml的去离子水,充分搅拌溶解;最后定容至100ml,用0.45μm滤膜过滤除杂。 3.置于棕色瓶中4℃保存。 (注意:丙烯酰胺具有强烈的神经毒性,可通过皮肤吸收并具有累积性。配制时应戴手套操作) |
| 10%(W/V)过硫酸铵 ﹡组分浓度 10%(W/V) 过硫酸铵 ﹡配制量 10ml ﹡配制方法: 1.称取1g过硫酸铵。 2.加入10ml的去离子水后搅拌溶解,贮存于4℃。 (注意:10%过硫酸铵溶液在4℃保存能使用两周左右,过期会失去催化效果) |
| 5X Tris-Glycine Buffer ﹡组分浓度 0.125M Tris,1.25M Glycine,0.5%(W/V) SDS ﹡配制量 1L ﹡配制方法: 1.称取下列试剂,置于1L的烧杯中 Tris 15.1g Glycine 94g SDS 5.0g 2.加入约800ml的去离子水,搅拌溶解。 3.加入去离子水定容至1L后,室温保存 |
| 2X SDS-PAGE Loading Buffer ﹡组分浓度 100mM Tris-HCl (pH 6.8) 4%(W/V) SDS 0.2%(W/V) 溴酚蓝 20%(V/V) 甘油 2%(W/V) β-巯基乙醇 ﹡配制量 5ml ﹡配制方法 : 1.称取下列试剂,置于15ml塑料离心管中 1M Tris-HCl (pH 6.8) 0.5ml SDS 0.2g 溴酚蓝 10mg 甘油 1ml 2.加入去离子水溶解定容至5ml。 3.小份分装,0.5ml一管,室温保存。 4.使用前将25μl的β-巯基乙醇加入混匀。 |
| 5X SDS-PAGE Loading Buffer ﹡组分浓度 250mM Tris-HCl (pH 6.8) 10%(W/V) SDS 0.5%(W/V) 溴酚蓝 50%(V/V) 甘油 5%(W/V) β-巯基乙醇 ﹡配制量 5ml ﹡配制方法: 1.称取下列试剂,置于15ml塑料离心管中 1M Tris-HCl (pH 6.8) 1.25ml SDS 0.5g 溴酚蓝 25mg 甘油 2.5ml 2.加入去离子水溶解定容至5ml。 3.小份分装,0.5ml一管,室温保存。 4.使用前将25μl的β-巯基乙醇加入混匀。 |
