高频考点一 基因工程及蛋白质工程
考法一 基因工程操作的基本工具和流程
1.(2016湖北5月模拟,40)
我国拥有自主知识产权的抗虫棉,是将苏云金芽孢杆菌的Bt毒蛋白基因导入到棉花的叶肉细胞中培育而成。回答下列问题:
(1)在该基因工程中,Bt毒蛋白基因属于________,离体棉花叶肉细胞属于__________。Bt毒蛋白基因可从基因组文库中获取,也可从cDNA文库中获取,含有基因中启动子的文库是____________文库。
(2)获取的Bt毒蛋白基因需要与载体结合构建基因表达载体。在基因工程中使用的载体有质粒、λ噬菌体的衍生物、____________等,其中质粒的化学成分是________。
(3)科学家最初做抗虫棉实验时,虽已经检测出棉花植株中含有抗虫基因,但让棉铃虫食用棉花叶片时,棉铃虫并没有被杀死,这说明Bt毒蛋白基因____________。为此,科学家对棉植株中的Bt毒蛋白基因进行了修饰,结果食用了棉叶的棉铃虫中毒死亡了,从变异类型分析,这种对Bt毒蛋白基因的修饰属于____________。
(4)转基因植物存在一定的安全性问题,为避免Bt毒蛋白基因通过花粉传播进入其他植物,一般将Bt毒蛋白基因转入棉花细胞的________(填“细胞核”或“叶绿体”)。
【答案】(1)目的基因 受体细胞 基因组
(2)动植物病毒 DNA
(3)没有成功表达 基因突变
(4)叶绿体
【解析】(1)在该基因工程中,Bt毒蛋白基因属于目的基因,离体棉花叶肉细胞属于受体细胞。Bt毒蛋白基因可从基因组文库中获取,也可从cDNA文库中获取,含有基因中启动子的文库是基因组文库。(2)在基因工程中使用的载体有质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等,其中质粒的化学本质是小型环状DNA。(3)科学家最初做抗虫棉实验时,虽已经检测出棉花植株中含有抗虫基因,但让棉铃虫食用棉花叶片时,棉铃虫并没有被杀死,这说明Bt毒蛋白基因没有成功表达。因为目的基因能否表达受到基因结构中非编码区上游的序列的控制,因此,要想解除非编码区上游对基因表达的抑制,必须对非编码区上游的序列进行修饰,所以从变异的角度分析,基因修饰使基因得到表达属于基因突变。
考法二 基因工程的应用及蛋白质工程
2.下图是某种动物蛋白质工程示意图,请据图回答下列问题:
(1)目前,蛋白质工程中难度最大的是图中编号________所示的过程,实现③过程的依据有_________________________________________________。
(2)在⑤过程中,________连接酶既可以“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端,又可以“缝合”双链DNA片段的平末端。
(3)为获得较多的受精卵进行研究,⑥过程需用激素做________处理。若⑥过程所得的卵母细胞是从屠宰母畜的卵巢中获得的,则体外受精前的⑧过程表示在体外人工培养卵母细胞到______________期。
(4)为提高培育成功率,进行⑩过程之前,需对胚胎进行质量检查,应取部分滋养层细胞,以________为探针进行DNA分子杂交检测。对受体动物需要用特定的激素进行__________处理。
【答案】(1)① 氨基酸与密码子的对应关系;mRNA与DNA间的碱基互补配对原则 (2)T4DNA (3)超数排卵 减数第二次中 (4)目的基因 同期发情
高频考点二 细胞工程
考法一 植物细胞工程
3.(2016河北邯郸一中二模,40)我国菊花主要有杭菊、亳菊、怀菊、贡菊等8种,是药食兼优的代表性植物。研究发现杭菊具有明显的抗炎作用,怀菊具有良好的抗病毒作用(但是抗炎作用很弱)。结合所学知识回答下列问题:
(1)欲培育兼有明显抗炎、抗病毒疗效的菊花新品种,用杭菊和怀菊杂交的方法是做不到的,原因是________________________________。
(2)基因工程方法为培育上述新品种提供了可能性,在实施基因工程过程中,最关键的步骤是____________________________。受体细胞的选择直接关系到实验的成功与否以及新生植株的品质,我们一般选取未开花的幼枝的芽尖,理由有____________________、__________________(写出两个)。若想确定杭菊的受体细胞中是否导入了怀菊的抗病毒基因,常用的检测方法是____________________。
(3)如果利用植物体细胞杂交的方法培育“杭菊怀菊”杂种植株,首先要获得这两种植物细胞的__________,用聚乙二醇诱导处理后,诱导实验材料再生出____________,再利用植物组织培养技术培育出杂种植株。
(4)理论上利用植物体细胞杂交和基因工程的方法均可以培育出抗炎、抗病毒的优良菊花,这两项技术的共同特点有____________________________________________。
【答案】(1)二者存在生殖隔离
(2)基因表达载体的构建 不带病毒或带病毒极少 分化程度低或易诱导脱分化和再分化(答案必须是两个方面) DNA分子杂交技术
(3)原生质体 细胞壁
(4)定向改造生物(或克服了远缘杂交不亲和障碍)
【解析】(1)杭菊和怀菊属于两个不同的物种,二者之间存在生殖隔离,所以二者之间不能进行有性杂交。(2)基因工程的关键步骤是基因表达载体的构建;由于幼枝的芽尖具有不带病毒或带病毒极少、分化程度低或易诱导脱分化和再分化的特点,所以通常选取未开花的幼枝的芽尖作受体细胞;可用DNA分子杂交技术检测怀菊的抗病毒基因(目的基因)是否导入了受体细胞。(3)植物体细胞杂交技术首先要获得这两种植物细胞的原生质体,用聚乙二醇诱导处理后,诱导实验材料再生出细胞壁,再利用植物组织培养技术培育出杂种植株。(4)植物体细胞杂交技术和基因工程的共同特点是定向改造生物(或克服了远缘杂交不亲和障碍)。
考法二 动物细胞工程及应用
4.(2016河北衡水模拟调研四,40)血管内皮生长因子(VEGF)是目前发现的诱导肿瘤血管生成的最强烈的血锌生成因子,针对VEGF生产的抗肿瘤药物,是治疗癌症的一个方向;芝加哥大学的Katherine Knight博士成功地在转基因兔中获得骨髄瘤样肿瘤,经技术改进,能高产量地生产兔单克隆抗体;我国江苏省某公司首次在全球成功开发出人源化兔单抗药物“注射用人源化抗VEGF单克隆抗体”(SIM63),有效打破了公司的技术垄断。人源化抗体可以大大减少异源抗体对人类机体造成的免疫副反应。请回答下列相关问题:
(1)动物细胞在体外培养的技术属于__________工程,由于人们对动物细胞所需的营养物质没有完全搞清楚,在使用合成培养基时,通常需要加入__________等一些天然成分:在培养时除提供细胞所需的O2外,还需要CO2,其作用是____________________。
(2)在基因工程中,将目的基因导入动物细胞现今极常用、极有效的方法是__________,要在短时间内扩增大量的目的基因采用____________技术,这个技术中的关键酶是______________。
(3)当VEGF作为抗原进入动物体内时,动物体内的某些B细胞分化为浆细胞,这种浆细胞只分泌针对VEGF的一种抗体,但B细胞在体外培养不会无限增殖,解决这一问题的方法是通过动物细胞融合技术得到杂交瘤细胞,常用的化学诱导融合试剂为____________,要分离出杂交瘤细胞,应该用__________培养基进行筛选,单克隆抗体最主要的优点是它的______________________________,并可大量制备。
【答案】(1)动物细胞 血清(或血浆) 维持培养液的pH
(2)显微注射 PCR(多聚酶链式反应) Taq酶(热稳定DNA聚合酶)
(3)聚乙二醇(PEG) 选择 特异性强、灵敏度高 高频考点三 胚胎工程
考法一 胚胎工程操作流程及应用
5.(2016湖北两校联考,40)下图为科学家采用不同方法培育良种牛的过程,请据图回答有关问题:
(1)与一般的繁育良种动物方式相比较,胚胎移植的优势是__________________________。为提高良种奶牛的繁殖能力,在获取卵母细胞之前需用促性腺激素对奶牛进行处理,目的是________。
(2)“转基因牛”D培育过程中,常用受精卵作为外源基因的受体细胞,主要原因是________________。
(3)图中数字标号①代表的结构为__________,①将来发育为________________,c→d过程需对其均等分割的目的是__________________________。A、B牛基因型是否相同?______________。
(4)在培育良种牛的过程中,都运用了动物细胞培养技术。在动物细胞培养过程中,为防止杂菌的污染而要加入一定量的__________。
【答案】(1)可充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力 超数排卵
(2)受精卵的全能性易于表达
(3)内细胞团 胎儿的各种组织 有利于胚胎的恢复和进一步发育 相同 (4)抗生素
【解析】(1)与一般的繁育良种动物方式相比较,胚胎移植可充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力;对良种母牛注射促性腺激素可促使其超数排卵。(2)由于受精卵的全能性易于表达,因此良种牛培育过程中,常用受精卵作为外源基因的受体细胞。(3)图中①为内细胞团,将来发育为胎儿的各种组织;c→d过程需对其均等分割,这样有利于胚胎的恢复和进一步发育。来自同一个胚胎的后代具有相同的基因型,因此A、B牛的基因型相同。(4)在动物细胞培养过程中,为防止杂菌的污染而要加入一定量的抗生素。
考法二 生物工程的综合应用
6.(2016湖南五市十校模拟,40)下列是生物学技术制备抗体的两个途径模式简图。请据图回答下列问题:
(1)过程①至②所获取的抗体1称为____________,其中过程①是指细胞工程中的__________________技术。
(2)④过程需要__________________酶,⑤过程则需要的工具酶为____________________。
(3)②处需要筛选,其培养基称为______________(填“液体培养基”“选择培养基”或“鉴别培养基)。结构甲的组成必须包括启动子、__________及目的基因等(写两项)。
(4)如果想用棉花产生该种抗体,则⑥过程的受体细胞通常选用______________菌,经过筛选后再侵染棉花体细胞,转化成功后通过____________技术获得能产抗体的转基因棉花植株。
【答案】(1)单克隆抗体 细胞融合
(2)逆转录 酶和DNA连接酶
(3)选择培养基 终止子、标记基因
(4)农杆 植物组织培养
【解析】(1)过程①至②所获取的抗体1称为单克隆抗体,其中过程①是指细胞工程中的细胞融合(或B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合)技术。(2)④是由mRNA形成DNA的过程,表示逆转录,需要逆转录酶;⑤过程为基因表达载体的构建,需要的工具酶为酶和DNA连接酶。(3)②过程表示杂交瘤细胞的培养,需要筛选,其培养基称为选择培养基,结构甲表示基因表达载体,其组成必须包括启动子、终止子、标记基因及目的基因等。(4)如果想用棉花产生该种抗体,则⑥导入受体细胞过程的受体细胞通常选用土壤农杆菌,经过筛选后再侵染棉花体细胞,转化成功后通过植物组织培养技术,即脱分化和再分化过程,获得能产抗体的转基因棉花植株。