生物类似药研发与评价须知(Quality part)

相关法规

生物类似药研发与评价（Quality part） 定义

适用范围

参照药

研发与评价的基本原则

药学研究与评价

生物技术药物特点

•相关法规

《中国药典》

《药品注册管理办法》

《生物类似药物研发与评价技术指导原则（试行）》

《人重组DNA技术产品总论》

《人用单克隆抗体产品总论》

•相关法规

生物类似药的申请程序：生物类似药按照新药的申请程序申报

根据产品性质和制备方法，生物类似药按照《药品注册管理办法》附件3中治疗用生物制品的相应注册分类进行申报，并按照治疗用生物制品申报资料项目，结合《生物类似药物研发与评价指导原则》的具体要求提交资料

填写《药品注册申请表》时，在“其他特别申明事项”中注明“本品按生物类似药研发申报”•生物类似药物研发与评价

定义

本指导原则所述生物类似药是指：在质量、安全性和有效性方面与已获准注册的参照药具有相似性的治疗用生物制品。

•生物类似药研发与评价

适用范围

本指导原则适用于结构和功能明确的治疗用重组蛋白质制品。对聚乙二醇等修饰的产品及抗体偶联药物类产品

等，按生物类似药研发时应慎重考虑。

生物类似药候选药物的氨基酸序列原则上应与参照药相同。对研发过程中采用不同于参照药所用的宿主细胞、表达体系等的，需进行充分研究。

•生物类似药研发与评价

参照药

定义：本指导原则所述参照药是指：已获批准注册的，在生物类似药研发过程中与之进行比对试验研究用的产品，包括生产用的或由成品中提取的活性成分，通常为原研产品。

参照药的选择：研发过程中各阶段所使用的参照药，应尽可能使用相同产地来源的产品。对不能在国内获得的，可以考虑其他合适的途径。临床比对试验研究用的参照药，应在我国批准注册。

对比对试验研究需使用活性成分的，可以采用适宜方法分离，但需考虑并分析这些方法对活性成分的结构和功能等质量特性的影响。按生物类似药批准的产品原则上不可用作参照药。

•生物类似药研发与评价

研发和评价的基本原则

比对原则

–生物类似药研发是以比对试验研究证明其与参照药的相似性为基础，支持其安全、有效和质量可控。

–每一阶段的每一个比对试验研究，均应与参照药同时进行，并设立相似性的评价方法和标准。

逐步递进原则

–研发可采用逐步递进的顺序，分阶段证明候选药与参照药的相似性。根据比对试验研究结果设计后续比对试验研究的内容。对前一阶段比对试验研究结果存在不确定因素的，在后续研究阶段还必须选择敏感的技术和方法设计有针对性的比对试验进行研究，并评价对产品的影响。

•生物类似药物研发与评价

一致性原则

–比对试验研究所使用的样品应为相同产地来源的产品。对候选药，应当为生产工艺确定后生产的产品，或者其活性成分。对工艺、规模或产地等发生改变的，应当评估对产品质量的影响，必要时还需重新进行比对试验研究。

–比对试验研究应采用适宜的方法和技术，首先考虑与参照药一致，对采用其他敏感技术和方法的，应评估其适用性和可靠性。

•生物类似药物研发与评价

相似性评价原则

–对全面的药学比对试验研究显示候选药与参照药相似，并在非临床阶段进一步证明其相似的，可按生物类似药开展后续的临床比对试验研究与评价。

–对不能判定相似性且仍按生物类似药研发的，应选择敏感的技术和方法，继续设计针对性的比对试验研究以证明其相似性。

–药学比对试验研究显示的差异对产品有影响并在非临床比对试验研究结果也被证明的，不宜继续按生物类似药研发。对按生物类似药研发的应慎重考虑。

–对临床比对试验研究结果判定为相似的，可按本指导原则进行评价。

•生物类似药物研发与评价非临床、临床研究

可比性

按照BP 程序申请质量研究方案

RP 选择质量相似不是BP

不是BP

•药学研究与评价

一般考虑

比对试验研究中应对样品质量的批间差异进行分析，选择有代表性的批次进行。研究中，应尽可能使用敏感的、先进的分析技术和方法检测候选药与参照药之间可能存在的差异。

工艺研究

候选药的生产工艺需根据产品特点设计，可以与参照药保持一致，尤其是工艺步骤的原理和先后顺序及中间过程控制的要求，如纯化、灭活工艺等；对于不一致的，应分析对质量相似性评判的影响。

•药学研究与评价

工艺研究

候选药的生产工艺需根据产品特点设计，可以与参照药保持一致，尤其是工艺步骤的原理和先后顺序及中间过程控制的要求，如纯化、灭活工艺等；对于不一致的，应分析对质量相似性评判的影响。

分析方法

应采用先进的、敏感的技术和方法，首先考虑采用与参照药一致的方法。对采用其他技术和方法的，应提供依据。对某些关键的质量属性，应采用多种方法进行比对试验研究。

•药学研究与评价

EMA：Considerations on analytical procedures

Suitability of available analytical methods

--Given the complexity of the molecule and its inherent

heterogeneity ,the set of analytical techniques should represent

the state-of-the-art. It is the duty of the manufacture to

demonstrate that the selected methods used in the comparability exercise would be able to detect slight differences in all aspects

pertinent to the evaluation of quality.

Validation of analytical methods

--Methods used in the characterisation studies form an integral

part of the quality data package and should be appropriately

qualified for the purpose of comparability. Before entering the

clinical trial needed for comparability purposes, release tests

should be validated in accordance with the ICH guidelines.

•药学研究与评价

特性分析

理化特性

–理化鉴定应包括采用适宜的分析方法确定一级结构和高级结构（二级/三级/四级）以及其他理化特性。还应考虑翻译后的修饰可能存在差异，如氨基酸序列N端和C末端的异质性、糖基化修饰

（包括糖链的结构和糖型等）的异同。应采用适宜的方法对修饰

的异同进行比对试验研究，包括定性和定量分析研究。

–对于氨基酸序列测定的比对试验研究，可以与已知的参照药序列直接进行比对。

–FDA: Test used to characterize the product do not necessarily need to be validated for routine quality control purposes, but

should be scientifically sound, fit for their intended use, and

provide results that are reproducible and reliable.

•药学研究与评价

Structural characteristics

Amino acid composition (e.g. acidic hydrolysis followed by IE HPLC with UV detection)

Peptide mapping (e.g. UPLC + ESI-MS)

Peptide fingerprint of L-and H-chains for mAbs(MALDI-MS) N-and C-terminal amino acid sequences (MALDI-MS/MS)

Molecular mass (MALDI-MS, SDS-PAGE)

Secondary structure (CD, FTIR)

Tertiary structure (CD, Fluorescence)

Free thiol groups and disulfide bridges (MALDI-MS, Ellman’s assay)

•药学研究与评价

生物学活性

–应采用先进的、敏感的方法进行生物活性比对试验研究，首先考虑采用与参照药一致的方法。对采用其他技术和方法的，应提供依据。

–对具有多重生物活性的，其关键活性应当分别进行比对试验研究，并设定相似性的评判标准；对相似性的评判，应根据各种活性与临床效果相关的程度确定评判相似性的权重，并设定标准。

•药学研究与评价

纯度和杂质

–应采用先进的、敏感的方法进行纯度和杂质比对试验研究，首先考虑采用与参照药一致的方法。对采用其他技术和方法的，应提供依据。对纯度的测定，应从产品的疏水性、电荷和分子大小变异体及包括糖基化在内的各类翻译后修饰等方面，考虑适宜的技术和方法进行研究；对杂质的比对试验研究，应从工艺的差异、宿主细胞的不同等方面，考虑适宜的方法进行。

–对杂质图谱的差异，尤其是出现了新的成分，应当进行分析研究，并制定相应的质量控制要求，必要时在后续的比对试验研究中，还应采用针对性的技术和方法，研究其对有效性、安全性包括免疫原性的影响。

•药学研究与评价

FDA：If comparative physicochemical analysis reveals comparable product-related impurities at similar levels between

the two products, pharmacological/ toxicological studies to

characterize potential biological effects of specific impurities may not be necessary. However, if the manufacturing process used to produce the proposed biosimilar product introduces different

impurities or higher levels of impurities than those present in the

reference product ,additional pharmacological/toxicological or

other studies may be necessary.

•药学研究与评价

Charge variants-isoelectric point isoforms profile (clEF, CZE) Charge variants-acidic and basic variants( IE-HPLC)

Related proteins( SDS-PAGE)

Truncated forms( Western Blot)

Aggregates( SEC-HPLC)

Oxidized forms( peptide mapping, RP-HPLC)

Deamidated forms (peptide mapping, RP-HPLC)

Low molecular imputrities(CE under non-reducing conditions) Residual host cell DNA( molecular hybridization/PCR)

Residual host cell protein (ELISA)

Residual protein A (ELISA)

•药学研究与评价

免疫学特性

对具有免疫学特性的产品的比对试验研究应尽可能采用与参照药相似原理的技术和方法。具有多重免疫学特性的，应对其关键特性分别进行相关的比对试验研究，并设定相似性的评判标准；对相似性的评判，应根据各种特性与临床效果相关的程度确定评判相似性的权重，并设定标准。

•药学研究与评价

质量标准

候选药质量指标的设定和标准应符合药品管理相应法规的要求，并尽可能与参照药一致。对需增加指标的，应根据多批次产品的检定数据，用统计学方法分析确定标准，并结合稳定性数据等分析评价其合理性。

EMA: These data should demonstrate, whenever possible, that the limits set for a given test are not wider than the range of variability of the representative reference product, unless justified.

•药学研究与评价

稳定性研究

按照有关的指导原则开展对候选药的稳定性研究。对加速或强制降解稳定性试验，应选择敏感的条件同时处理后进行比对试验研究。

对比对试验研究，应尽可能使用与参照药有效期相近的候选药进行。

FDA：These comparative studies should be conducted under

multiple stress conditions (e.g. high temperature, freeze thaw, light exposure, and agitation) that can cause incremental product

degradation over a defined time period.

•药学评价与研究

其他研究

宿主细胞

应考虑参照药所使用的宿主细胞，也可采用当前常用的宿主细胞。对与参照药不一致的，需进行研究证明与有效性、安全性

等方面无临床意义的差别。

FDA：For example, The expression system can have a

significant effect on the types and extent of translational and

post-translational modifications that are imparted to the

proposed protein product, something that may complicate an

effort to demonstrate that the proposed biosimilar product is

highly similar to the reference product( and thus, for example,

affecting the type and extent of nonclinical and clinical data that are needed for demonstrating biosimilarity).

•药学研究与评价

制剂处方

应进行处方筛选研究，并尽可能与参照药一致。对不一致的，应有充足的理由。

规格

原则上应与参照药一致。对不一致的，应有恰当的理由。

内包装材料

应进行内包装材料的筛选研究，并尽可能使用与参照药同类材质的内包装材料。对不同的，应有相应的研究结果支持。

•药学研究与评价

药学研究相似性的评价

•对药学研究结果相似性的评判，应根据与临床效果相关的程度确定评判相似性的权重，并设定标准。

•1．对综合评判候选药与参照药之间无差异或差异很小的，可判为相似。

•2．对研究显示候选药与参照药之间存在差别，且无法确定对药品安全性和有效性影响的，应设计针对性的比对试验研究，以证实其对药品安全性和有效性的影响。

•3．对研究显示有差异，评判为不相似的，不宜继续按生物类似药研发。

•药学研究与评价

国内生物仿制药水平rHuEPO等电聚焦电泳图谱