
在薄层层析条件下,鉴定芸香苷和槲皮素的步骤如下:
1、样品制备:将待测药物粉末按照一定比例加入适量的甲醇中,充分振荡混合,过滤后获得待测样品溶液。
2、薄层层析板涂层:将硅胶薄层层析板加热至100℃,降温后在玻璃板上均匀涂覆一层薄层硅胶,待其干燥后可以进行下一步操作。
3、样品上样:在涂层好的硅胶板中,用微量注射器将待测样品溶液在硅胶的底端沿着一条线上均匀地滴上去,然后将其干燥。
4、开发:用开发剂(甲醇-水-浓氨水(70:20:10))将硅胶板放入密闭的槽中,让开发剂自下而上渗透,直到液面接近硅胶涂层的顶部即可取出。
5、显色:将涂层板晾干后,用紫外灯照射检测,然后用5%硫酸乙醇溶液喷雾,再用加热器烘干,最后在紫外灯下观察。
6、鉴定:根据芸香苷和槲皮素的Rf值和显色特点进行鉴定。芸香苷的Rf值为0.41,显色为紫红色;槲皮素的Rf值为0.64,显色为黄色。