在操作721型可见分光光度计时，首先应确保仪器已连接电源并打开开关，随后掀开样品室的暗箱盖进行预热，预热时间建议为10分钟。
接下来，将灵敏度开关置于“1”档位，如果在调整零点调节器时无法将指针调至“0”，则可以考虑使用更高的档位。根据实验需求，转动波长选择钮来选择合适的波长。
将空白液和待测液分别倒入比色杯至杯子的3/4处，用擦镜纸仔细擦去外壁上的残留物，然后将比色杯放入样品室内，确保空白管位于光路上。
在暗箱盖处于开启状态的情况下，通过调节零点调节器使读数盘指针指向T=0的位置。然后，关闭暗箱盖，通过调节“100”调节器使空白管的透射比达到100%，待指针稳定后，轻轻拉出样品滑竿，依次读取并记录各个样品的光密度值。
实验完成后，应关闭电源，并取出比色皿进行清洗。同时，用软布或软纸清洁样品室，以保持其干净整洁。
