南京26路公交车是市区线路，起点是花神家具港，运营时间从早上5:00至晚上11:00，而终点是云南北路，运营时间从早上5:50至晚上11:40。此线路采用无人售票，空调车票价为2元，IC卡通用。
公交总公司的去程路线包括云南北路、鼓楼（中山北路）、丹凤街、鱼市街、洪武北路、新街口（市文化艺术中心）、户部街（洪武路）、内桥、三山街（北）、长乐路（夫子庙）、中华门内（中华门城堡）、雨花路、雨花台、雨花新村、公交总公司驾校（公交四公司）、安德门[雨花南路]、安德门（地铁站北）、菊花台、时光澔韵、小行、小行里、小行小区（地铁小行站）以及花神家具港，共经过23个站点。
回程路线从花神家具港出发，经过小行小区（地铁小行站）、小行里、小行、时光澔韵、菊花台、安德门（地铁站北）、安德门[雨花南路]、公交总公司驾校（公交四公司）、雨花新村、雨花台、雨花路、中华门内（中华门城堡）、长乐路（南）、三山街（夫子庙）、内桥、户部街（洪武路）、新街口（五星电器）、洪武北路、鱼市街、丹凤街、保泰街、傅厚岗、玄武湖公园（湖南路）最终到达云南北路，共经过25个站点。
