酶反应缓冲液的浓度通常是终浓度，但在实际操作中，如果配制量较小，例如只有10毫升，直接计算称量可能会导致较大的误差。为了提高精确度，建议先将各种成分配制成浓缩液，比如1M Tris-HCl，然后按比例加入到所需的体积中，例如配制10毫升缓冲液时，只需加入1毫升的1M Tris-HCl浓缩液。同样，对于DTT也可以配制1M的浓缩液，然后加入总体积的20%，再用蒸馏水补足至总体积。混合均匀即可完成配制。
除了Tris-HCl，其他成分也可以按照类似的步骤进行配制。值得注意的是，这种缓冲液还具有特定的pH值，可以通过1M Tris-HCl来控制pH。其他pH值的调整则不必考虑。
在配制过程中，还需要注意的是，不同成分的使用量应严格按照实验要求进行，以确保酶反应的稳定性。此外，配制好的缓冲液应尽快使用，避免长时间存放导致成分挥发或变质。
配制缓冲液时，还需要注意的是，操作过程中应佩戴适当的防护装备，如手套和实验服，以防止化学品对皮肤和衣物造成损害。同时，操作应在通风良好的环境中进行，避免吸入有害气体。
最后，配制完成后的缓冲液应妥善保存，避免受到污染或变质。通常，缓冲液应在避光、阴凉处保存，并避免与酸碱性物质接触。在使用前，应先检查缓冲液的状态，确保其符合实验要求。
