
植物多糖的分离纯化方法如下:
1. 溶剂提取法
- 水提法:使用热水浸煮提取,热水对植物组织的穿透力强,提取效率高。热水提取法适用于大多数植物多糖的提取。
- 酸碱提法:使用稀酸或稀碱作为提取剂,根据多糖的性质选择合适的提取方法。
- 生物酶提取法:利用酶技术,在温和条件下分解植物组织,加速多糖的释放或提取。
- 超声提取法:利用超声波的高频率机械波,对细胞膜产生破坏,提高提取效率。
- 微波提取:利用微波的非电离电磁波,穿透细胞壁,使有效成分释放。
2. 植物多糖的分离纯化
- 除蛋白:选择试剂使蛋白质沉淀而不影响多糖沉淀,常用方法有Sevage法、三氟三氯乙烷法、蛋白质水解酶处理、反复冻融法等。
- 脱色:使用吸附剂、离子交换柱、氧化剂等脱除植物多糖提取物中的色素。
- 除小分子杂质:采用透析法、纤维滤器透析法等脱除小分子杂质。
- 多糖的分级纯化:根据溶解性、分子大小和形状、分子所带基团的性质进行分级,常用的方法有分步沉淀法、盐析法、季胺盐沉淀法、柱层析法等。
3. 多糖的纯度鉴定
- 常用的纯度鉴定方法有高效液相、凝胶层析法、电泳法、色谱法、旋光度法等。
4. 常见问题
- 蛋白质的脱除是多糖分离纯化的难点,可以尝试使用天然澄清剂等方法简化提取工艺,提高多糖纯度。
- 脱色过程中,活性炭可能会吸附多糖,造成多糖损失。