音叉是一种呈“Y”形的钢质或铝合金发声器，能够因其质量和叉臂长短、粗细的不同而在振动时发出不同频率的纯音。在医学领域，音叉检查被用于鉴别耳聋性质，是一种简便可靠的诊断方法。钢琴调律过程中，音叉作为取“标准音”的重要工具，其重要性在于决定钢琴各键音的音高位置。
在教学中，音叉可以用来演示共振原理。通过轻敲或重敲音叉，可以观察到音叉振幅的变化与波形图幅度的关系，进而发现响度与音叉振动振幅之间的联系。具体表现为，轻敲音叉时，音叉振幅小，波形图幅度小，音叉发出的声音也小；重敲音叉时，音叉振幅大，波形图幅度大，音叉发出的声音也大。这说明响度与音叉振动振幅密切相关，振幅越大，响度越大；振幅越小，响度越小。
目前，最常用的音叉频率为440Hz，这个音高长久以来被作为乐团的调音标准，因为它同时为小提琴第二弦的音高以及中提琴第一弦和大提琴第一弦的高八度音高。市场上也有其他音高的音叉，如发出钢琴部基准组所有音高的音叉。
音叉的发明者是英国人约翰·朔尔（John Shore），他在1711年发明了音叉。他是一位宫廷小号手和作曲家，曾为格奥尔格·弗里德里希·韩德尔及亨利·普赛尔的曲子中写下专门表演的段落。他还是一个鲁特琴手，鲁特琴难以调音，因此他发明了音叉来调音。
音叉发出的音符微弱，通常只有在耳边才能听得清楚。为了增加音量，有时会在敲击后将音叉压在如桌子等固体平面上，使平面起到共振板的作用，从而大幅增加音量。音叉主要用于乐器调音，虽然电子调音器已经存在，一些音乐家也拥有绝对音感，但在某些情况下，音叉仍然是不可或缺的工具。
即便经过调音，音叉的频率仍会因材料的弹性模数改变而受影响。为了确保音叉发出准确的音高，仍应将其封存在温湿度控制良好的地方。大型音叉通常由电力驱动，如同电铃，可以不间断地震动，以维持其频率稳定性。
