在进行叶绿素提取时，准备工作需在半暗的环境中进行，以避免光线对实验的影响。室温应控制在25℃左右，以确保提取过程的稳定性。
提取步骤包括：首先，取1000克新鲜绿叶，在韦氏搅切器中粉碎。然后，将粉碎后的绿叶加入少量碳酸钙和丙酮中，在20℃下进行萃取，直到叶子碎片变为无色。
之后，将过滤后的丙酮提取液放入盛有1升石油醚和100ml丙酮的漏斗中，轻轻旋转并加入蒸馏水，直至分层。水层中的大部分丙酮和水溶性杂质会被丢弃，仅保留石油醚溶液。
接下来，将石油醚溶液用蒸馏水再次净化，然后用含有石油醚和0.01克草酸的200ml80%甲醇溶液清洗5次以上，最终得到黄绿色悬浮液。
使用无水硫酸钠干燥悬浮液，并将其倒入3cm厚的蔗糖粉末制成的柱中。用石油醚清洗沉淀的色素，去掉类胡萝卜素，仅保留天然叶绿素。
含有天然叶绿素的蔗糖柱分为两层，其中绿层有4-10mm的叶绿素b层，蓝层为2-6mm的叶绿素a层。将蓝层中部的部分放入醚中，进行过滤和洗提，用蒸馏水清洗，用硫酸钠干燥，再用器皿过滤，得到叶绿素a。
将绿层中部部分移出，迅速放入醚中过滤和洗提，制成叶绿素b醚溶液。
叶绿素的分离可通过色谱法实现，这是一种非常有效的分离、纯化和鉴定有机化合物的方法，尤其适用于微量分析。果蔬中的色素主要包括脂溶性的胡萝卜素、叶黄素和叶绿素，以及水溶性的花青素。
在提取实验中，可通过相似相溶的原理将水溶性花青素滤掉，然后利用薄层色谱、柱色谱或高效液相色谱对胡萝卜素、叶黄素和叶绿素进行分离。
由于这三种色素的极性依次减弱，可以选择单一有机溶剂或不同配比的混合溶剂作为展开剂和洗脱剂，以确定最佳分离条件。
