食品中还原型Vc的测定(分光光度法)

Determination of reductive form ascorbic acid in foods

在蔬菜水果中含量丰富，易溶于水，酸性，以还原型抗坏血酸、脱氢型抗坏血酸、二酮古乐糖酸三种形式存在于食品中。

测食品中总Vc含量的方法：荧光法和2，4二硝基苯肼法。

测食品中还原型Vc的方法：分光光度法。

新鲜食品中Vc主要以还原型的形式存在，因此，本实验学习食品中还原型Vc的测定。

一、实验目的

1.理解食物中维生素C的分布规律以及维生素C的理化特性。

2.掌握分光光度法测定食品中还原型Vc的原理、操作步骤、注意事项

二、实验原理

在乙酸溶液中，抗坏血酸与固蓝盐B反应生成黄色的草酰肼-2-羟基丁酰内酯衍生物。在最大吸收波长420 urn处测定吸光度，与标准系列比较定量。

三、仪器

1. 蔬菜、水果:

样品采来后，整棵菜（不掰开）洗净吹干，均匀取样，稍切碎。称取可食部分50.0 g于捣碎机内，加同倍量的乙酸溶液(2 mol/L)捣成匀浆。用烧杯称取10.0 g 匀浆(含0.2 g /kg以下抗坏血酸)于100m L棕色容量瓶内，加5mL乙酸溶液(2mol/L)，用水稀释至刻度，混匀。滤纸过滤，滤液备用。不易过滤的试样可用离心机离心后，上清液测定。

2 标准曲线的绘制

精密吸取0, 0.1, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1.0, 1.5, 2.0m L抗坏血酸标准使用液(相当于抗坏血酸0, 10.0, 20.0 ,40.0, 60.0, 80.0 ,100.0 ,150.0, 200.0µg)，分别置于10 mL比色管中。各加0.3 mL EDTA二钠溶液(0.25m ol/L),0.5 mL乙酸溶液(0.5mol/L),1.25mL固蓝盐B溶液(2g /L)，加水稀释至刻度，混匀。室温(20℃ -25℃)下放置20 min后，移入1cm比色皿内，以零号管调节零点，于波长420 nm处测定吸光度A，绘制标准曲线。

3 试样的侧定

精密吸取按1.0 mL样液(约相当于抗坏血酸200µg以下)于10mL比色管中，以下按标准曲线测定方法依次加入其它试剂。加水稀释至刻度，混匀。室温(20℃ -25℃)下放置20 min后，移入1 cm比色皿内，以零号管调节零点，于波长420 nm处测定吸光度A。从标准曲线上查出样液中抗坏血酸含量。

六、数据记录

C

                X =    ——————— × 100

                                  v1 

                       m × —— × 1000

                     V2

式 中：

X — 试样中抗坏血酸的含量， mg/100g；

V1— 测定时所取溶液体积，mL；

V2 — 试样处理液总体积， mL；

       M — 试样质量，g；