TT标准操作流程

标准操作流程

目录

1 目的

2 检测原理

3 产品信息

4 试剂配制

5 试剂保存和稳定性

6 预防和警告

7 样本收集和准备

8 检测需要但试剂盒中未提供的耗材

9 质量控制

10 操作流程

11 结果

12 局限性

13 参考范围

14 性能特征

15 参考文献  

1 目的

    此程序提供在软件版本为2.0-2.6的ACL 8000-9000仪器上进行凝血酶时间（TT）测试的指导。该测试特别用于弥散性血管内凝血（DIC）的评估，肝素抗凝治疗和溶栓治疗的监测，纤维蛋白或者纤维蛋白原降解产物（FDP）、遗传性或者获得性纤维蛋白原的数量或者质量异常、以及纤溶亢进等的检测。

2 测试原理

    在过量的纯化的牛凝血酶试剂的存在下，样本中的纤维蛋白原被转化为纤维蛋白，仪器检测凝固形成所需要的时间。

3 产品信息

   凝血酶试剂盒包括：

   缓冲液： 1 x 9 mL浓缩溶液，内含0.5mol/L的氯化钙，缓冲液和保存液。

   牛凝血酶： 4瓶冻干粉牛凝血酶(15 UNIH/瓶)，含牛血清白蛋白和缓冲液。

4 试剂准备

   缓冲液： 用NCCLS II型或相同质量的去离子水按1:5 (1+4)倍数按需稀释           

            浓缩缓冲液，用来溶解凝血酶，用前混匀。

  牛凝血酶：根据样本来源和具体应用的不同需要，复溶瓶中内容物：

    稀释缓冲液       凝血酶浓度

 筛查测试          5.0 mL    3.0 UNIH/mL

      8.0 mL    1.9 UNIH/mL

 肝素治疗      2.0 mL    7.5 UNIH/mL

   盖上盖子，轻轻混匀。确保充分溶解。放15-25°C 平衡30分钟，用前颠倒混匀。请勿用力振摇。

5 试剂保存和稳定性

   未开封的试剂可在2-8 oC稳定至试剂盒上标明的有效期。

   稀释缓冲液：配制完成后，在15-25°C 环境下稳定一个月。

   牛凝血酶：复溶后于原瓶中2-8 oC稳定15天；在ACL 8000-10000上（15oC）稳定24小时。无需添加搅拌磁珠。

   为了最佳试剂保存，建议不使用时，将试剂从仪器系统撤回，使用原瓶，保存于2-8 oC。

6 预防和警告

    吞食有害 (R22)；避免与皮肤和眼睛接触(S 24/25)。不可倒入排水沟(S 29)。需穿着相应的防护服(S 36)。

    缓冲液中所含的叠氮钠，在含铅的金属管中可能形成易爆的叠氮化物，请恰当处理废弃物。

     本产品仅用于体外诊断。

7 样本收集和准备

   9份新鲜静脉血加入1份枸掾酸三钠抗凝剂中混匀。

   有关样本采集，处理和贮存的详细说明请参阅临床和实验室标准委员会CLSI (原 NCCLS) H21-A4 文件。

8 检测需要但试剂盒中未提供的耗材

   以下耗材未包含在试剂盒内，但为检测所需，需要另外购买。

HemosIL Normal Control 1 Unassayed （未定值正常质控）           20003120

HemosIL Low Abnormal 2 Control Unassayed （未定值异常质控）   20003220

HemosIL Normal Control Assayed  （定值正常质控）              20003110

HemosIL Low Abnormal Control Assayed （定值异常低值质控）     20003210

HemosIL Cleaning Solution （清洗液A）                         9831704

9 质量控制

   推荐使用两个水平的质控进行完整的质量控制过程。上表中所列HemosIL质控可用于该质控程序。每个实验室应当建立自己的平均值和标准差，以及整套质控程序用来监测实验测试。 依据良好的实验室规范，质控应当每8小时运行一次。请参阅Westgard et al 文献判别质控出控并获得相应的解决办法。

10 操作流程

1、如需要，确认适当的TT，TTd， TTe 和 TTed测试项目被活化（操作手册第4章节）。

2、如需要，定义液体设置（操作手册第4章节）。

3、如需要，建立质控文件（操作手册第3章节）。

4、如需要，设置组合，包含TT，TTd， TTe 和 TTed。如使用单测试/组合测试，使用或不使用条码运行样本，请参阅手册（操作手册第4章节）。

5、在样本盘上装载原始试管，样本杯和/或质控。确保条码管上的条码朝向样本盘外壁。

6、选择 Analysis，选择 Profile Session。在当前组合下选择下拉图标，选择含有PT测试的组合。这将允许TT，TTd， TTe 和 TTed在同一批次内完成测试。

a、如选择 Profile Session，在当前组合下，下拉选择一个包含TT， TTd 和 TTe项目的测试组合，这将利于 在同一次测试内完成Fib-C和其它不同稀释度的纤维蛋白项目测试。

b、如选择 Single Test Session，选择 TT 项目。需要使用TTd或TTe的样本必须再次选择TTd或TTe 进行另外单独测试（低于2.0的软件版本，TT项目只能使用Single Test模式进行测试）。

7、选择 Read Bar Codes 图标，不含条码的样本。比如质控样本将会触发样本识别错误报警。选择 OK ，并通过选择 Enter/Edit Sample ID 图标输入样本编号，或者选择 Add QC 添加质控编号。如需要，请重复以上操作。

8、如果 LIS 为非选项，对没有测试请求的样本选择 Order Test 图标。使用箭头键选择一个测试，选择 Program Tests 图标添加项目测试请求。按Confirm 图标保存设置并关闭窗口。

9、在状态栏内（待测）确保所有测试均提示 “P” 。

10、选择 Materials Map 图标。检查试剂耗材位置，更新耗材量，检查批号，反应盘等等。

11、选择 START 图标。

12、仪器将确认可用的反应孔，并且提示操作者输入反应盘上第一和最后一个孔的位置。

11 结果

   凝血酶时间以秒数报告结果。更多详情，请参阅仪器操作手册。如果有任何的旗标或者报警信息出现，请参阅操作手册获得更多详情。

12 局限性

   TT 结果受许多常用治疗药物的影响。得到异常TT结果时，应当做更多进一步的研究和测定，以确定产生异常结果的根源。

13 参考范围

      参阅试剂盒内说明书确定参考范围。参考范围的确定是根据国际临床化盟（IFCC）推荐的方法使用特定批号的试剂测试获得的。由于许多不同的因素均可影响凝固时间，每个实验室应当建立自己实验室的参考范围。

当前实验室的参考范围ACL  ____________________ 

使用试剂 _________________________:

   精密度:

   批内和总的（每次和每天累计)精密度是使用包括正常和异常的质控样本来进行评估的。

   精密度研究的结果请参阅试剂盒说明书。

相关性:

   相关性是由使用特定批号的试剂和质控品而获得的。

   相关性测试结果请参阅试剂盒说明书。

15 参考文献

1.HemosIL Thrombin Time (P/N9758515) package insert issued 03/2005, Instrumentation Laboratory.

2.ACL™ 8000/9000/10000 Operator’s Manual, P/N190854-68, Rev 1, Feb 2004, Instrumentation Laboratory.

3.Clinical and Laboratory Standards Institute (formerly NCCLS). Collection, Transport, and Preparation of Blood Specimens for Coagulation Testing and Performance of Coagulation Assays – 4th Edition; Approved Guideline. NCCLS document H21-A4, Vol. 23, No. 35, 2003.