发酵罐的操作规程

一、使用前的技术准备

    1. 上岗前的技术培训：GRJ-D发酵罐是机电一体化的高科技设备，因此；操作人员上岗前必须进行技术培训，使他们熟悉整个系统的工作原理、管路、阀门的操作程序，并对空压机、电热蒸汽发生器能正确操作使用。未经培训的人员，不得单独上岗操作。

    2. 设备使用之前，应先检查电源是否正常，空压机、蒸汽发生器、循环水系统是否能正常工作。

    3. 检查系统上的阀门、接头及紧固螺钉是否拧紧。

    4. 开动空压机，用0.15Mpa压力，检查发酵罐、过滤器、管路、阀门的密封性能是否良好，有无泄漏。

    5. 溶氧仪、pH仪、PLC系统应根据使用说明书进行检查、校正。

6. 上岗人员对上述各项必须能熟练操作。

二、空消

    在投料前，气路、料路、发酵罐必须用蒸汽进行灭菌，消除所有死角的杂菌，保证系统处于无菌状态。

    1. 空气管路的空消

    (1) 空气管路上有除水减压阀，和除菌过滤器。除水减压阀不能用蒸汽灭菌，因此在空气管路通蒸汽前，必须将通向除水减压阀的阀门KQF1关死，使蒸汽通过蒸汽过滤器然后进入除菌过滤器。

    (2) 空消过程中，除菌过滤器下端的排气阀应微微开启，排除冷凝水。

    (3) 空消时间应持续40分钟左右，当设备初次使用或长期不用后启动时，最好采用间歇空消，即第一次空消后，暂定3～5小时再空消一次，以便消除芽孢。

    (4) 经空消后的过滤器，应通气吹干，约20～30分钟，然后将气路阀门关闭。

    2. 发酵罐空消

    (1)发酵罐是将蒸汽直接通入罐内进行空消。

    (2) 空消时，应将罐上的接种口，排气阀，及料路阀门微微打开，使蒸汽通过这些阀门排出，同时保持罐压为0.13～0.15Mpa。

    (3) 空消时间为30～40分钟，特殊情况下，可采用间歇空消。

   （4）空消结束后，应将罐内冷凝水排掉。

 注意：1.发酵罐空消时，应将夹套内的水放掉，空消时最好将夹套排水阀打开，       

          以防夹套水排不净。    

        2.空消时，溶氧、pH电极应取出，可以延长其使用寿命。

三、实消

    实消是当罐内加入培养基后，用蒸汽对培养基进行灭菌的过程。

    1. 空消结束后，首先需将pH、Do电极校正好后装入罐体中的接头中，然后将配好的培养基从加料口加入罐内，此时夹套内应无冷却水。

    2. 培养基在进罐之前，应先糊化，一般培养基的配方量以罐体全容积的70％左右计算(泡沫多的培养基为65％左右，泡沫少的培养基可达75～80％)，考虑到冷凝水和接种量因素，加水量约为罐体全容积的50~60％左右，加水量的多少与培养基温度和蒸汽压力等因素有关，需在实践中摸索。

    3. 为了减少蒸汽冷凝水，实消先利用夹套通蒸汽对培养基进行预热，保持夹套压力≤0.1Mpa，待培养基温度到达90℃后，关闭夹套蒸汽，改为直接向罐内通入蒸汽。

    4. 当罐压升至0.12Mpa，温度升到121~123℃时，控制蒸汽阀门开度，保持罐压不变，30分钟后停止供汽。

5. 打开冷却水的进排阀门，在夹套内通水冷却。

注意：1.在夹套通水冷却时，罐压会急剧下降，当罐内压力降至0.05Mpa时，微微

        开启排气阀和进气阀，开启电机进行通气搅拌，加速冷却速度，并保持罐压为 

        0.05Mpa，直到罐温降至接种温度。    

四、接种、培养 

    1. 本设备采用火焰封口接种，接种前应事先准备好酒精棉花、钳子、镊子和接种环。

    2. 菌种装入三角烧瓶内，接种量根据工艺要求确定。

    3. 将酒精棉花围在接种口周围点燃，用钳子或铁棒拧开接种口，此时应向罐内通气，使接种口有空气排出。

    4. 将三角瓶的菌种在火环中间倒入罐内。

    5. 将接种口盖在火焰上灭菌后拧紧。

    6. 接种后即可通气培养，罐压保持在0.05Mpa。

    7. 发酵温度根据工艺要求而定，通过调节循环水的温度来控制发酵温度，当环境温度高于发酵温度时，需用冷水降温。

8. 溶氧量的大小主要通过调节进气量来实现。

9. pH的调节是由控制系统通过执行机构（蠕动泵）自动加碱来实现。

   10. 泡沫报警是由泡沫探头探测到泡沫液位信号在触摸屏上以指示灯的形式来实现。

   11. 在发酵中途要取样检查时，可通过取样口取样。取样前，取样管路阀门需用蒸汽灭菌，防止杂菌污染而引起误导，取样结束后同样要用蒸汽冲洗取样管道阀门。

五、出料

     1. 本设备的出料是利用罐压将发酵液从出料管道排出，根据发酵液的浓度，罐压可控制在0.05～0.1Mpa。

     2. 出料后取出溶氧、pH电极，进行清洗保养。

     3. 出料结束后，应立即放水清洗发酵罐及料路管道阀门，并开动空压机，向发酵罐供气搅拌，将管路中的发酵液冲洗干净。

六、 维修与保养 

     1. 安置设备的环境应整洁、干燥、通风良好，水、汽不得直接泼到电器上。

     2. 设备启用之后，必须及时清洗，防止发酵液干结在发酵罐及管路、阀门内。

     3. 溶解溶氧、pH探头、仪表，应按规定要求保养存放，压力表、安全阀、温度仪每年应校准一次。

     5. 设备停止使用时应清洗、吹干。过滤器的滤芯应取出清洗、凉干，妥善保管，法兰压紧螺母应松开，防止密封圈永久变形。