天津科技大学微生物重点笔记

第一章绪论

细菌学、微生物学的奠基人及其贡献；

微生物的五大共性；真细菌和蓝细菌之间的差别；原核生物的六大类：三菌三体；

第二章

细菌、放线菌、酵母菌、霉菌的比较

1、形态特征、大小

细菌：球菌、杆菌、螺旋菌

2、细胞结构（酵母菌、霉菌重点把握，细胞器水平）相区别之处

细菌细胞结构：

细胞壁的组成、结构、G+和G-细胞壁的区别（重点）。G染色重点掌握，G染色的原理、操作步骤、注意事项。

G+菌-------溶菌酶

常见菌的G分类（大肠杆菌、枯燥芽孢杆菌等）；及其染色结果。

细胞壁缺陷的几类细胞，以及在生产中的应用。（重点）

3、细菌的外部结构：荚膜（成分、染色方法）、鞭毛（观察方法：拴菌、穿刺）

芽孢（抗逆性强、抗热机制：渗透调节皮层膨胀学说）-----------筛选方法：80度水浴芽孢的结构

芽孢染色：孔雀绿；G染色（结果不染色）

细菌（100*10）、酵母菌（40*10）、霉菌（10*10或40*10）的观察方法。

4、繁殖方式：

细菌：二放线菌（产生抗生素）：产生无性孢子、菌丝断裂

酵母：有性-----形成子囊和子囊孢子的方式

无性-----芽殖；裂殖；产生无性孢子（节孢子、掷孢子、厚垣孢子）霉菌：有性-----担子菌（担子）

无性-----根霉（孢子囊孢子）、毛霉（孢子囊孢子）、青霉（分生孢子）、曲霉（分生孢子）

酵母：单倍-----八孢裂殖酵母

双倍-----路德类酵母

单、双倍-----酿酒酵母

酿酒酵母的生活史（重点）

5、菌落特征（细菌、放线菌、酵母菌、霉菌的区别）

6、典型工业用菌，拉丁名，功能：

枯草芽孢、E.coli、酿酒酵母、乳酸菌、黑曲霉、黑根霉、桔青霉、总状毛霉、犁头霉

补充：

抗生素------链霉菌属；

霉菌菌丝的种类与构造；

菌丝体功能及特化形式（菌核、厚垣孢子）；

三体的差别；

蓝细菌-----异形胞------功能（固氮）

第三章病毒

噬菌体：即原核生物的病毒，包括噬细菌体、噬放线菌体和噬蓝细菌体等。

病毒：特性

培养、纯化的方法--------------双层平板法

典型病毒形态特征、结构：动物病毒（球形、卵圆形、砖形）

植物病毒（杆形、丝状）

细菌病毒（蝌蚪状）

化学组成：蛋白质、核酸

亚病毒：类病毒（只含RNA一种成分）

拟病毒（类类病毒、RNA或DNA）

阮病毒（蛋白质）

阮病毒致病机理：蛋白质的构象变化

噬菌体的复制周期/过程：吸附，侵入，增殖（复制与生物合成），成熟（装配）和裂解（释放）。

噬菌体与宿主的关系（溶原性）

病毒的滴度（效价）

一步生长实验

第四章

1、六大类营养要素的功能、添加方式（供给方式）、多功能营养物的概念

六大类营养要素：N、C、能源、生长因子、无机盐、水

2、配制培养基的原则

各种培养基的概念及其分类

3、微生物营养类型的区别及代表菌株

4、单纯扩散、促进运输、主动运输、基团移位的概念及区别

5、选择、鉴别培养基的原理及应用

伊红--美兰（EMB）-------重点复习

第五章

1、化能异养微生物的生物氧化三种产能方式：有氧、无氧、发酵（主要从概念上掌握）。

发酵（厌氧发酵）注意看一下

2、乙醇、乳酸、甘油发酵（途径（一步））、丙酮丁醇发酵、混合酸发酵、丁二醇发酵。

这些要求不高，知道即可。基本是后面的知识点性质的题目。

3、酵母菌工程

运动发酵单胞菌乙醇（ED途径）

知识点：

EMP途径（糖酵解途径）以葡萄糖为底物与人类生产实践关系来看，他与乙醇、乳酸、甘油、丙酮和丁醇的发酵生产关系密切。

由EMP途径中丙酮酸出发的发酵菌有：由大肠杆菌进行的混合酸发酵；由产气肠杆菌等进行的2，3-丁二醇发酵。

运动发酵单胞菌可通过ED途径将丙酮酸脱羧成乙醛，乙醛又可以进一步被NADH2还原为乙醇。

V.P.实验就是利用E.aerogenes（产气肠杆菌）能产生乙酰甲基甲醇，因其在碱性条件下可被氧化成二乙酰，若用胍基的精氨酸与二乙酰反应，就可以产生特征性的红色反应（V.P.阳性），而与E.aerogenes近缘的E.coli呈V.P.阴性，故极易区别两菌。

第六章微生物的生长和控制

1、微生物的生长测定法法：

1.1计数法：

直接计数：血球计数法总菌数（先染色，后镜检，可计活菌数）

间接计数：倾注法、涂布法（厌氧菌的菌落计数法—亨盖特滚管培养法）

膜过滤法：

比浊法（细菌）：OD值比色越高，菌数越多。

1.2质量法（霉菌、放线菌）：菌丝的湿重、干重、蛋白质含量、DNA含量

1.3生理指标法

2、单细胞微生物的典型生长曲线（定义）

四个时期：延迟期:特点、缩短措施

指数期：特点、操作

稳定期：大量合成的产物

衰亡期：代谢物

四个时期的特点及对生产的指导意义、绘生长曲线（OD值）。

生长速率常数（R）,代时（G），繁殖代数（n）

公式和概念要知道即可，不用计算。

3、同步培养方法（机械筛选法、条件控制法）

恒浊、恒化培养的原理、控制方法和应用。（重点）

4、温度、PH、水活度、氧气、辐射、渗透压对微生物生长的影响。

5、消毒、灭菌、防腐、化疗的概念。

灭菌：常用的物理灭菌方法：加热法

防腐：常用的防腐剂和消毒剂以及各自的用法

化疗：两类化学治疗剂是抗代谢和抗生素，注意其定义、机理和生产中的应用。

第七章微生物的遗传变异和育种

1、三个经典实验（名称牢记）证明了遗传变异的物质基础。

2、质粒的结构、特性、主要类型和检测方法。

3、基因突变的类型、机制（自发、诱发）。

常用的诱变剂：物理：UV

化学：

诱变剂的诱变原理。

AMES的具体原理和操作。（重点）

4、微生物诱变育种的过程：出发菌株、菌悬液的制备、诱变剂的选择和处理方法、中间培养、变异株的分离和筛选（抗代谢物结构类似物突变株、营养缺陷型突变株）。筛选方法（重点）。

遗传育种部分重点看看。

5、微生物的代谢

酶活性的调节种类

代谢在发酵中的应用：高丝氨酸缺陷型生产赖氨酸。（重点）

概念：野生型、营养缺陷型、原养型、基本培养基、完全培养基、补充培养基筛选营养缺陷型的方法和意义。

转化（方法）、转导、接合、有性杂交、准性生殖、原生质体融合。

感受态细胞的定义。

酶代谢调节：调节酶合成量的诱导阻遏机制

调节现有酶催化活力的反馈抑制机制

6、菌种衰退、复壮、保藏-----------此部分重点

菌种衰退的原因

菌种复壮及防止退化的方法

常用的菌种保藏的手段（低温、缺氧、干燥）

美国ATCC常用的保藏方法：冷冻干燥保藏法和液氮保藏法。

第八章微生物的生态（此部分比重较轻）

1、微生物在自然界的分布，最主要的来源是土壤。

2、互生、共生、拮抗、寄生的概念和典型代表。

3、污水处理的微生物原理。

活性污泥的概念

第九章微生物的分类

1、分类单元、命名法

重要和常用的微生物学名。（见了认识）

微生物的分类依据（传统分类学、现代分类学）、分类方法。

常用的几个微生物分类系统。

伯杰氏手册（英国）的分类标准是细菌生理生化实验。

2、三域系统（细菌域、古生菌域、真核生物域）

第十章传染与免疫

1、概念：单克隆抗体、类毒素、外毒素、内毒素、抗原、抗体、血清学反应、补体。

2、抗原、抗体的一般特性。

3、抗原、抗体的反应类型和应用。

补充实验：

设计从土壤中筛选一株高产蛋白酶的短小芽孢杆菌？

分析：1、细菌：培养基（肉汤）、培养温度

2、芽孢：水浴，高温处理筛选芽孢

3、蛋白酶：酪素（透明圈）

4、高产：比值法、诱变提产，诱变方法：物理、化学、基因工程

5、样品的来源：取样要有代表性（依据目的性）

解答：1、取样

2、准备培养基、稀释（10倍）

3、80度水浴加热筛选芽孢

4、稀释

5、涂布平板获得单个菌落（划线法）

6、产透明圈大的菌落，转移至斜面培养基

7、G染色鉴定是否含有芽孢，是否是杆菌8、通过生理生化实验进一步鉴定是否为短小芽孢杆菌（16sRNA）

9、摇瓶，测定产量（u/ml）

10、紫外线诱变

11、初筛（透明圈法）

12、复发酵，复筛

13、保藏

其他实验部分：（这部分知识基本都以知道即可，考试涉及的很少）

各种微生物的培养基、培养条件、培养方法、观察方法（液体：菌环、菌岛、菌蒲）、接种方法。

酵母菌出芽率测定中，出芽率、死亡率、大小（镜台测微尺、物体测微尺），以及什么是芽体。

假丝酵母培养方法。

真假菌丝的概念。

载片培养。

产气肠菌和大肠杆菌鉴别实验，四种方法：1、吲哚2、甲基红3、柠檬酸盐4、V.P.实验。

大肠菌群检测程序。

菌种保藏。