TAE与TBE的区别

TBE是Tris-硼酸，缓冲容量大，但是溶解度小，不易长期储存，易产生沉淀

TAE与TBE的区别

首先要知道 TAE 與 TBE 緩衝溶液的成份如下：

50x TAE Buffer (Tris-Acetate-EDTA)  

242 gm      Tris base  

57.1 ml     Acetic acid  100ml       

0.5M EDTA  

Add ddH2O to 1 liter and adjust pH to 8.5.

10x TBE Buffer (Tris-Borate-EDTA) 

108 gm    Tris base 

55 gm     Boric acid  

9.3 gm    Na4EDTA  

Add ddH2O to 1 liter.  

The pH is 8.3 and requires no adjustment.

它們的分別有下列幾點：

1. TBE 不能太濃 (它只可有 10 times)，因為 borate 會很容易沉澱，但一般有少許沉澱是不會有太大問題。

2. TBE 的 buffering capacity 比 TAE 高，用 TBE 來跑出來的 gel，分辨率 (resolution) 會比較高。

3. 因為 TBE 有 borate 離子 (ion)，它會影嚮酵素 (enzyme) 的工作。因此，若要為分離出的 DNA 進行下一步酵素處理，如 cloning 或 restriction cut 的話，就要切記不要讓 DNA 碰上 borate ion。

4. TAE的 buffer capacity 比較差，gel 一般比較模糊，但它不會對影嚮酵素

三种缓冲液的配制方法

Tris-乙酸（TAE）：50×浓贮存液（每升）：

242g Tris 碱

57.1ml 冰乙酸

100ml 0.5mmol/L EDTA(pH8.0)

使用时再稀释50倍。

Tris-磷酸（TPE）：10×浓贮存液（每升）：

108g Tris 碱

15.5ml 85％磷酸（1.679g /ml）

40ml 0.5mmol/L EDTA(pH8.0)

使用时再稀释10倍。

Tris-硼酸（TBE）：5×浓贮存液（每升）：

54g Tris 碱

27.5g 硼酸

20ml 0.5mmol/L EDTA(pH8.0)