PCR实验室人员专业能力测试及参

一、选择题（每题3分，共30分）

1、在PCR中，Taq DNA聚合酶与靶核酸的结合发生于下述过程中的哪一阶段：（ B ）

   A．变性    B．退火    C．延伸    D．以上均有

2、病原体核酸扩增检测的假阴性的可能原因有：（ D ）

A．试剂盒质量问题           B．标本处理不当

  C．抑制物的存在             D．以上均是

3、在临床基因扩增检验中，弱阳性室内质控样本测定含量偏低导致失控，常见的原因有下述各项，但除外：（ D ）

   A．核酸提取中的丢失、有机溶剂的祛除不彻底、标本中扩增抑制物残留等；

   B．扩增仪孔间温度的不均一性；

   C．Taq酶或反转录酶的失活；    D．扩增产物的污染

4、在定量PCR测定中，对原始模板准确定量的影响因素中最大的因素是：（ B ）

   A．原始模板的量    B．扩增效率    C．扩增周期数    D．扩增产物的量

5、人乳头瘤病毒项目的缩写是：（ C ）

   A．CT    B．HSV    C．HPV    D．CMV

6、在一个DNA分子中，如G所占摩尔比为17.2%，则A所占的摩尔比为：（ B ）

   A．82.8%    B．32.8%   C．17.2%    D．65.6%

7、PCR的三个反应步骤不包括下列哪项：（ C ）

   A．变性   B．退火    C．转录    D．延伸

8、目前EB-DNA检测所需的样本类型常为：（ D ）

   A．血清    B．血浆    C．乳汁    D．全血

9、下列哪种真空采血管不能应用于PCR样本中：（ B ）

   A．紫头    B．绿头    C．黑头    D．红头

10、哪些项目检测的核酸类型与其他项不同：（ D ）

   A．BCR-ABL-190  B．EV71    C．RV    D．JAK2V617F

二、填空题（每空1分，共25分）

11、PCR整个过程的基本反应步骤包括   变性  、  退火  、   延伸      。

12、荧光定量PCR中，一个完美的阳性扩增曲线包括    线性基线期               、

      指数期初期            、      指数期         、    平台期       四个阶段。

13、一个完整的PCR扩增体系主要由  Mg2+   、  缓冲液   、  dNTP    、  引物    、 

 模板      等基本要素所组成，其中   引物       不但决定了PCR扩增片段的长短，而且也是PCR扩增特异性的关键。

14、YMDD项目中Y、M、D、I、V分别代表的氨基酸为： 酪氨酸      、    蛋氨酸 、

   天冬氨酸       、   异亮氨酸    、  缬氨酸       。

15、临床血液标本中主要的PCR抑制物有：  血红蛋白   、 乳铁蛋白     、   IgG    。

16、化学品纯度分级从高到低分别为：   优级纯     、   分析纯     、   化学纯     、

 实验试剂         四级。

三、名词解释（每题5分，共15分）

17、Ct值：或称Cp值，指的是实时监测扩增过程的荧光信号达到指数扩增时的循环周期数。

18、溯源性：测量结果或标准的值通过连续的比较链与一定的参考标准相联系的属性，参考标准通常是国家或国家标准，比较链中的每一步比较都有给定的不确定度。

19、扩增效率E：指的是一个循环后的产物增加量与这个循环的模板量的比值，其值位于0～1。

四、问答题

20、请列出科室肠道病毒项目（2分），以及检测所需的样本类型（6分）。

EV71、CA16

鼻咽拭子、疱疹液、血清、血浆、脑脊液、粪便、肛拭子等

21、简述紫外、高温、电离辐射以及醇类灭菌四种灭菌方法的基本原理（10分）。

紫外：病原体DNA吸收紫外线时，其一条链或两条链上相近的胸腺嘧啶之间形成二聚体，改变了DNA的分子构型，从而干扰DNA的复制，轻者致突变，重者死亡；此外、紫外线可使分子氧变成臭氧，也具有杀菌能力。

高温：高温是细菌蛋白发生凝固或变性，酶的活性随之消失。

电离辐射：细胞中的水分被电离成H+和OH－，这些游离基是强烈的氧化剂和还原剂，能破坏微生物的核酸、酶和蛋白质，使微生物死亡。

22、简述Westgard基本规则，如何运用（12分）？