316国道起点为福建福州，终点为甘肃兰州，全程2915千米。
它自东向西依次经过福建、江西、湖北、陕西、甘肃5个省份。在福建境内，从福州出发，途径南平，连接起当地重要城镇与经济节点。进入江西后，经过九江等地，进一步延伸线路。到达湖北，穿过武汉等城市，武汉作为中部重要交通枢纽，316国道在此发挥着重要的运输作用。
进入陕西，经过安康、汉中，在地形复杂的秦巴山区蜿蜒前行，促进了山区与外界的交流。最后抵达甘肃，经过天水、定西等地，最终到达兰州。
316国道贯穿多个省份，连接起众多城市与乡村，在区域经济交流、物资运输、人员往来等方面发挥着重要作用，对沿线地区的发展意义重大。
