
实验名称:细胞的渗透性实验
一,实验目的:
1. 了解细胞膜的渗透性
2 .了解各种小分子物质跨膜进入红细胞的速度
二,实验原理:
细胞膜具有对物质选择透过的生理功能。脂溶性越高通透性越大,水溶性越高通透性越小;非极性分子比极性容易透过,小分子比大分子容易透过。水分子可通过由膜脂运动而产生的间隙。非极性的小分子如O2、CO2、N2可以很快透过脂双层,不带电荷的极性小分子,如尿素、甘油等也可以透过人工脂双层,尽管速度较慢,分子量略大一点的葡萄糖、蔗糖则很难透过,而膜对带电荷的物质如:H+、Na+、K+、Cl–、HCO3 –是高度不通透的。
将红细胞放入数种等渗溶液中,由于红细胞对各种溶质的透性不同,
有的溶质可以渗入,有的溶质不能渗入,深入的溶质可以提高红细胞
的渗透压,所以促进水分进入细胞,引起细胞溶血。由于溶质渗入的
速度互补相同,因此溶血时相同。
三,实验器材:
鸡血,0.85%的氯化钠溶液,0.0085%的氯化钠溶液,0.8mol/L的甲醇,0.8mol/L的丙三醇,6%的葡萄糖溶液,2%的Triton X—100溶液,试管六支,离心机,滴管,载玻片,显微镜等
四,实验步骤:
1、取鸡血2-3ml加入0.85%的氯化钠溶液4ml,在1000r/min条件下离心5分钟,(RBC压积量不少于0.3ml,否则应补加鸡血)
2、将上述离心的红细胞按沉淀量配成50%浓度的溶液(总体积量不少于0.6ml)
3、取六支试管,分别加入如下溶液个3ml
(1) 0.85%氯化钠溶液 (2) 0.0085%的氯化钠溶液
(3) 0.8mol/L的甲醇 (4) 0.85mol/L丙三醇
(5) 6%的葡萄糖溶液 (6) 2%的Triton X—100溶液
4、向上述六支试管中加入50%的红细胞悬液1滴,轻摇混匀,观察是否有溶血现象发生(观察时间1小时),记录溶血时间并于显微镜下观察 各种溶液中的细胞。
五,实验现象与结果:
实验结果:
| 试管编号 | 是否溶血 | 时间 | 结果分析 |
| 1,0.85%氯化钠溶液+1滴稀释鸡血 | 否 | ------- | 鸟类的是生理盐水的浓度是0.85%,故不发生溶血现象 |
| 2,0.0085%的氯化钠溶液+1滴稀释鸡血 | 是 | 大约50秒 | 0.0085%的氯化钠溶液是标准的低渗溶液,故发生溶血现象,且比较快 |
| 3,0.8mol/L的甲醇+1滴稀释鸡血 | 是 | 大约20秒 | 甲醇的穿膜能力较强,溶血较快 |
| 4,0.85mol/L丙三醇+1滴稀释鸡血 | 是 | 大约30分钟 | 丙三醇的分子量较大,不易溶血 |
| 5,6%的葡萄糖溶液 +1滴稀释鸡血 | 否 | 大约35钟分 | 葡萄糖的分子量也比较,溶血较慢 |
| 6,2%的Triton X—100 溶液+1滴稀释鸡血 | 是 | 大约30秒 | Triton X—100R溶液是非离子表面活性剂,能溶解膜表面的蛋白质,溶血较快 |
(1和2) (1和3) (1和4)
(1和5) (1和6)
溶血现象在显微镜下的图片:
3号管在10秒左右的溶血
五,实验分析;
1,由于甲醇和Triton X—100溶液渗透较快,所以观察时也要迅速,应事先做好准备,观察时也要快
2,丙三醇和葡萄糖渗透的较慢,应每十分钟观察一次,才有现象
