微生物限度检查室管理规程

范围：适用于微生物实验室。

职责：微生物检测人员及检验室负责人对此规程执行负责。

内容：

1.微生物实验室包括微生物限度检查室、阳性菌接种室及抗生素微生物检定室。

 微生物实验室结构应坚固、严密、防尘、光线明亮，地面应光滑，并应有缓冲间，设双层传递窗传递物件。

 室内温度18～26℃，相对湿度为45～65%，室内必须保持整洁。

2.微生物实验室洁净度要求：

微生物实验室洁净度应符合相应的医药洁净室设计规范和验收要求。

 操作室洁净度应符合洁净度C级要求。

 操作台洁净度应符合洁净度A级要求。

3.微生物实验室的使用：

 微生物实验室由微生物检验员管理及使用,其他人员须经主管人员批准后方可进入和使用。

 微生物实验室的人员需经过相关的岗位培训，必要时定期进行再培训。

 微生物实验室操作人员应严格遵守洁净工作区域净化控制规定。

 保持个人卫生，不得佩带饰物，不得涂抹化妆品。

 室内应穿戴专用衣帽、口罩及鞋子。

 手部应进行2次消毒，宜带无菌手套。

 在操作中，操作台面应垫上消毒布巾，以防操作中有滴落液污染台面。

 人员进入微生物限度检查室、阳性对照室或抗生素微生物检定室前，在一更脱外衣、换鞋后，进入一更缓冲间洗手，并消毒后，进入二更自上而下依次换上洁净帽、口罩、洁净服、洁净鞋后，进入二更缓冲间，手经再次用消毒液消毒后方可进入微生物限度检查室或阳性对照室，实验操作前须带上无菌手套。

 微生物实验室使用前应确保操作室的洁净程度。

 微生物实验室的清洁分为一般清洁及彻底清洁，其具体的清洁部位、方式方法、频率见下表所示：

 试验开始前应做好相关试验的准备工作，确保在试验过程中不离开操作室。

 进入操作室的任何东西外包装均需消毒处理。

 物料进入微生物实验室以前，脱去外包装或者用酒精棉球擦拭后，放置于传递窗中。

 物料放置于传递窗后，开启紫外小时，同时将微生物实验室内的净化系统、紫外灯打开。

 紫外开启小时以后，关闭紫外，并将物品转移于实验操作台上。

 实验完毕后，微生物实验室物品经传递窗传出后，经高温灭菌后废液、废物倒入废液桶处理。

 与试验样品接触的任何器具均应预先灭菌处理。

 清洁消毒用器具应专室专用，不得混用。

 试验操作中应进行沉降菌检测，以便判断操作环境是否符合要求。

 在进行微生物试验时，在操作区域左、中、右分别打开3个培养平板直至试验结束，关闭平板。

 大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA平板）倒置于30℃～35℃的培养箱中培养；沙氏培养基（SDA平板）倒置于20℃～25℃的培养箱中培养。

 不同的微生物试验项目不得在同一时段同一区域操作台中进行。

 产品初始污染菌检查，不得与产品无菌试验同时进行。

 工艺用水微生物检查，不得与产品无菌试验同时进行。

 有菌培养物试验必须在阳性菌接种室生物安全柜内操作。

4.微生物实验室的维护：

 微生物实验室应定期清洁消毒。

 每次操作前用消毒液擦拭台面。

 每次操作结束，做好清场，不遗留本次试验用具和物品。

 每次操作结束，用消毒液擦拭操作台面、消毒灯、操作台内外表面、操作室门把手等凸出面及辅助房间的地面。

 每月用消毒液擦拭操作室及辅助房间的墙面、门窗及门顶和房间顶棚、操作台底部。

 定期按洁净室控制要求检测房间及操作台环境洁净度，视检测结果采取相应的措施。

 微粒浓度达到相应等级要求的50%，重新大扫除；达到相应等级要求的80%时，如通过大扫除还不能下降粒子数，则应考虑更换高效过滤器。

 沉降菌超过相应等级要求或发现芽孢菌或真菌，用化学试剂熏蒸。

 大扫除或熏蒸后应再次检测，以证明环境符合洁净度要求。

5. 微生物实验室废弃物的控制：

 染菌培养物及菌悬液在丢弃前应在阳性室内完成销毁工作，合适的方法是121℃30分钟高压蒸汽灭菌处理。

 接种环在使用后立即在火焰上烧灼处理。

 接触菌液的塑料吸嘴使用后应立即泡入中效消毒剂溶液内，40分钟以上。

 未长菌的培养基或过期的培养基在丢弃前应进行去营养处理，可以选用121℃30分钟高压蒸汽灭菌。

6. 微生物实验室相关工作的记录：

 操作室及操作台的使用清场记录。

 操作室及操作台的定期检测记录。

 操作室及操作台的定期清洁消毒记录。

 培养基的采购、使用记录。

 工作用菌株的采购、传代、销毁记录。

 灭菌器的灭菌记录。

 废弃物的处理记录。