分子生物学基本知识复习提要(版,有待更新)20130613

1 分子生物学：是研究细胞内生物大分子（主要就是核酸和蛋白质）的结构和其在生物遗传信息保存、维护和传递过程中所行使的功能以及这些生物大分子物质相互作用特点和规律进而来研究生命现象的一门新兴科学。

2 分子生物学产生与发展过程大致可以划分为哪五个阶段？

第一阶段（1866-1928）：经典遗传学研究

第二阶段（1928-1959）：微生物遗传研究

第三阶段（1958-1972）：分子遗传研究

第四阶段（1972-1990）：基因重组研究

第五阶段（1990-至今）：基因组和蛋白质组学研究

3 1952年，A. D. Hershey 和M. Chase用 35S和 32p分别标记T2噬菌体的蛋白质和核酸，感染大肠杆菌, 确认了 “DNA是遗传信息的载体”这一学说

4 1953年，Watson和Crick建立DNA双螺旋模型。该年，也通常被认为分子生物学的诞生年。

5 1958年， Crick提出遗传信息传递的中心法则

6 1972年， P. Berg 创建了重组DNA（Recombinant DNA）技术

7 1961年， Jacob和Monod 提出操纵子学说

8 1977年，F. Sanger建立双脱氧末端终止DNA测序方法

9 19年，人类基因组工程（HGP）启动

10 1986 年，K. Mullis建立聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction, PCR）技术

11生物信息学：以计算机为工具对生物信息（主要是指DNA、RNA和蛋白质的序列、结构和功能信息）进行储存、检索（收集和筛选）、处理（编辑、整理、管理和显示）及利用（计算、模拟）的一种技术体系。它是当今生命科学和自然科学的重大前沿领域之一，同时也将是21世纪自然科学的核心领域之一。该研究工具主要由数据库、计算机网络和应用软件三大部分组成。

12 分子生物学研究内容主要包括基因组DNA重组、基因表达与、生物大分子结构与功能以及生物信息学和生物组学等几个方面

第二部分

1 生物细胞的染色体主要由DNA和蛋白质两类物质构成。

2 DNA二级结构即为DNA双螺旋结构，其构象类型有B-DNA、A-DNA、Z-DNA、C-DNA和D-DNA等类型。其中，B-DNA是细胞生物中最常见的类型。

3 A-DNA和B-DNA都为右手螺旋，C-DNA为左手螺旋

4 DNA具有增色效应（即变性后，其260 nm 光吸收值明显增加）

5 核酸水解酶有核酸外切酶和核酸内切酶两种类型

6 DNA变性：一个双链DNA分子其双链碱基间的氢键断裂，变成两条单链结构的过程。变性可使DNA活性部分或全部失去，但不能破坏其一级结构。

7熔解温度Tm: 是指DNA分子热变性过程中，紫外吸收值增加量到达最大增量一般时的温度。

8 DNA复性：又称为DNA退火，是指变性的DNA的互补链在适当条件下重新缔合双链的过程。

9  DNA的两个基本功能是储存遗传信息和作为DNA复制和RNA转录的模板。

10  质粒是大多原核生物细胞内存在于核区外的DNA颗粒。

11  原核生物大部分只含有一条环状染色体DNA，也有少数部分含有多条染色体DNA（环状或线性）

12 核质体是细菌在DNA复制前基因组高度压缩的结构

13 细菌有两种拓扑异构酶，即为I型拓扑异构酶和II型拓扑异构酶

14 原核生物基因组结构特点：基因组大小一般不超过10 Mb，不含内含子，编码蛋白质或RNA的序列多以转录单元形式存在，只含有一个复制子

15 复制以DNA分子为模板，合成相同序列DNA分子的过程。

16 转录(Transcription): 是以DNA分子为模板，合成相应碱基序列的RNA分子的过程。

17 翻译(Translation): 是以mRNA分子为模板，依据三联体密码规则，合成相应氨基酸序列的蛋白质肽链的过程。

18 原核生物双链环状DNA分子方式为θ型

19 DNA复制的两个重要机制，分别为半保留复制和半不连续复制

20 复制子

21 DNA复制和RNA合成，每条新链都是按照5’到3’端方向进行的

22 原核生物DNA复制的主要物质构件：模板（亲代双链DNA分子）、底物和金属离子（dNTP和镁离子）以及酶类和蛋白质（拓扑异构酶II、接连酶、DNA聚合酶 I、DNA聚合酶 II、DNA聚合酶 III、单链结合蛋白等）

23 DNA聚合酶：（由Kornberg 在1959年之前发现）：是催化DNA合成的一类酶的统称。以母本DNA链为模板，按照碱基配对原则，将dNTP逐个加到新合成DNA链（或片段）（按5’ → 3’ 方向延伸）3’端上。

24 大肠杆菌的DNA聚合酶 II没有5’ → 3’外切活性，DNA聚合酶III在DNA复制当中起着合成新链的作用

25 Klenow 片段，是指DNA聚合酶 I经枯草杆菌蛋白酶或胰蛋白酶水解生成的较大片段，该片段具有聚合酶活性和5’ → 3’外切酶活性

26 DNA复制过程包括启动、合成DNA链延伸以及终止等步骤。

27 在DNA复制过程中，会在后随链的前端（靠近复制叉的地方）形成冈崎片段

28 保证DNA复制的忠实性因素包括碱基之间的氢键配对作用、DNA聚合酶选择正确碱基的作用、DNA聚合酶的校正作用以及复制后校正等

29 tRNA的二级结构构型为三叶草模型，其上包括氨基酸臂和反密码子环

30 原核生物mRNA的特点：半衰期短（转录合成1min后就开始降解），有部分以多顺反子的结构形式存在，在AUG上游7-12 nt处有SD序列

31 转录所需要的模板是整个DNA分子。

32 原核生物RNA聚合酶全酶由核心酶和σ因子构成，σ因子能够识别不同启动子

33 原核生物启动子区域包括两个保守序列，即-10区（或TATA box）和-35区（或CAAT box）

34 简要叙述原核生物RNA转录过程

35 原核生物转录终止方式有强终止子终止和ρ因子辅助终止

36 遗传密码：

37 简要描述一下遗传密码规则：mRNA编码区上的紧密相连的三个核苷酸组合为一个密码子，其可以编码一种氨基酸。mRNA分子有种密码子，其中有61种是编码氨基酸的，UAA、UGA和UAG是终止密码子，其也是蛋白质合成的终止信号。每种氨基酸可以有1-6种密码子，其中甲硫氨酸的密码子AUG，也是生物通用的起始密码子，作为蛋白质翻译的起始信号。

38 密码子特性包括连续性、简并性、通用性以及反密码子摇摆性

39 原核生物翻译主要包括氨基酸活化、肽链起始、肽链延伸、肽链终止以及蛋白质折叠与加工等过程

40 在核糖体上，存在着与氨基酸新链合成密切相关的三个位点即A位（活化tRNA接受位点）、P位（肽键形成位点）和E 位（去氨基酸化的tRNA离开位点）

41 在原核生物中，起始tRNA所携带的是甲酰-甲硫氨酸，与延伸Met-tRNA所携带的氨基酸有差别

42 氨基酸活化，是通过氨基酸-tRNA合成酶来实现的。氨基酸-tRNA合成酶对氨基酸及其相应的tRNA都有特异识别作用

43 在翻译过程中，新肽链延伸存在着由进位-转位和移位构成的循环过程

44 转录是原核生物最主要的基因表达方式

45 操纵子：是DNA上的一段区域，包括共转录到一条mRNA上的多个结构基因和相应的一些顺式作用元件（包括启动子、操作子和部分基因序列）

46 顺式作用元件：是指对基因表达有调节活性的DNA序列

47 顺式作用元件包括启动子、终止子、基因、操作子、基因以及弱化子等

48 反式作用因子：基因产物(蛋白质或RNA)从合成的场所扩散到目标场所而发挥作用的过程称为反式作用（trans-acting），相应基因产物被称为反式作用因子。

49 原核生物反式作用因子，包括激活物(Activator)、阻遏物(Repessor)、转录因子（transcription factor）等

50 某基因或某操纵子转录随着细胞质中某一成分存在或消失而进行同步开启或关闭的模式称为正，该细胞质成分因具有转录激活作用被称为激活物。某基因或某操纵子转录随着细胞质中某一成分存在而关闭某一成分消失而开启的模式称为负，相应的细胞质成分称为阻遏物。

51 效应物有两种类型，即诱导物和辅阻遏物

52 全局性机制，细胞中所存在的能够同时调节多个操纵子转录表达的调节机制。

53 葡萄糖效应：葡萄糖是大肠杆菌最主要碳源，在葡糖糖与其他相应可利用碳源并存时，大肠杆菌会优先利用葡萄糖，这种机制为葡萄糖效应

54 试述乳糖操纵子-cAMP机制

55 经典乳糖操纵子转录物质构件

第二部分

1 端粒其重要功能使DNA复制完全保证染色体的性和完整性

2核小体由八聚体组蛋白（H2A、H2B、H3和H4各两个分子）、缠绕该八聚体外的约200 bp DNA 序列和H1蛋白组成。

3 植物细胞器基因组有线粒体基因组和叶绿体基因组两种

4 基因组（Genome）：单个物种单倍体全部染色体所携带的DNA序列信息的总称，一般是专指核基因组。

5 C值，单个基因组碱基对的多少

6 C值悖论：C值大小与生物进化程度不存在严格相对应关系，这种现象称为C值悖论（C value paradox）

7 按单倍体基因组序列拷贝数，可将DNA序列分为非重复序列、中度重复序列和高度重复序列。

8 按是否编码蛋白质序列，可将DNA序列分为编码序列和非编码序列。在基因组中，90%以上序列为非编码序列。

9 基因是具有遗传效应的一段DNA序列，其是生物遗传的结构单位和功能单位，其序列长度大多处于1-10 Kb范围内。

10 内含子：在编码区不能转录生成mRNA的DNA序列

11 外显子：在编码区能够转录生成mRNA的DNA序列，其上对应着相应氨基酸的序列

12 真核生物基因组序列特点：基因组C值庞大，基因数几千到几万个；基因组存在大量重复序列； 90%以上序列为非编码序列；转录产物为单顺贩子；一条染色体含有多个复制起点；大多基因为断裂基因；顺式作用单元有增强子和沉默子，两种启动子；有许多基因存在多拷贝；存在基因家族和基因簇

13 鸟法测序：

14 真核生物DNA复制方式为多个复制子单复制子双复制叉双向等速（每分钟移动约为几十到几百 bp ）移动复制，直至DNA分子的两端。每个复制子大小多处于30-300 Kb

范围内。

15 真核生物DNA复制过程方式：细胞生活周期水平（或点）：外界环境条件和个体营养生理状况可以决定某些细胞是否进入S期（即DNA复制期）

；染色体水平：决定同一条和不同染色体上各个复制点复制起始顺序；复制子水平：决定复制启动与否。 

16 PCR（ Polymerase  Chain  Reaction ，多聚酶链式反应）是由Mullis K B 1986年提出的一种体外简化条件下模拟DNA体内复制的DNA快速扩增的方法。

17 PCR扩增DNA复制机制为半保留复制机制。

18 每个PCR扩增循环，是由变性、退火和延伸构成。其常用延伸温度为72度。

19 PCR反应液有由反应液缓冲液（含有Mg2+）、DNA模板、上游引物和下游引物、dNTP 混合物、Taq酶以及ddH2O构成。 

20 分析PCR技术与DNA复制异同点。

（1）共同点：使相应DNA分子数增加。

（2）不同点：在发生场所、时间、模板、产物和产物数量上不同。

21 PCR技术特点：高度灵敏性、操作简单快捷、特异性

22 PCR技术主要应用：DNA片段克隆测序和DNA分子标记技术分析

23主要PCR技术变体：逆转录PCR（或RT-PCR）、Q-PCR、RACE-PCR、巢式PCR等。

24 PCR技术操作过程，包括引物设计、加样、PCR扩增、PCR产物检测和后续处理等。

25 真核生物核糖体构成：总大小为80 S，含有60 S 和40 S 两个大小亚基；大亚基含有28 S rRNA、5.8 S rRNA、5 S rRNA以及49 种蛋白质分子；小亚基含有18 S rRNA以及33 种蛋白质分子

26 真核生物三种RNA聚合酶作用：RNA聚合酶 I 合成5.8 S、18 S和28 S rRNA

；RNA聚合酶 III合成tRNA和5 S rRNA；RNA 聚合酶 II 合成mRNA、snRNA和hnRNA

27 mRNA 前体加工，也可以称为mRNA转录加工，在细胞核内对转录产物hnRNA在hnRNP（核糖核蛋白）上进行各种修饰、剪接和编辑，使编码蛋白质的外显子部分连接成一个连续的ORF（开放阅读框）的过程

28 真核生物mRNA 前体加工内容为：5’端加帽、3’端加polyA(多聚腺苷)尾巴及编码区剪接修饰和编辑

29 原核生物的起始tRNA携带甲酰甲硫氨酸（fMet）、真核生物则携带甲硫氨酸（Met）

30 基因表达：就是遗传信息从DNA分子传递蛋白质分子上的过程。对这个过程的，就称为基因表达（Regulation of gene expression）。基因表达，决定基因表达的时空性和表达模式。

31 基因表达意义：适应环境变化和保证多细胞生物的生长发育和繁殖等生命过程。

32 相对原核生物，真核生物基因表达有怎样特点。

（1）真核基因的转录与染色质的结构变化相关

（2）具有时相

（3）真核基因表达以正性为主

（4）多数真核基因在没有蛋白作用时是不转录的，需要表达时就要有激活的蛋白质来促进转录。

（5）其它特点：如个体发育复杂；受环境影响较小。激素水平和生长发育阶段比营养和环境，更能够影响真核生物的基因表达。

（6）真核基因表达的环节更多

33 真核生物基因表达主要方式：

（1）染色体（或DNA ）水平：染色体结构与基因构成

（2）转录水平：顺式作用元件与反式作用因子

（3）转录后水平：mRNA的加工、成熟及转运

（4）翻译水平：起始复合物及mRNA稳定性

（5）翻译后水平：蛋白质加工、修饰、转运

34 真核生物蛋白质运转两种机制：翻译/转运同步机制和翻译后运转机制

35 简述真核生物活性染色体结构的特点：（1）基因表达多发生在常染色质区 （2）在常染色质区，发生染色质重塑现象，使得相应区域转录单元活化。（3）在染色质重塑过程中，核小体组蛋白发生乙酰化或磷酸化，使得核小体不稳定，撤掉部分亚基，则核小体残体被转移到RNA聚合酶后面的自由DNA上，为相应区域DNA序列进一步发生转录做好相应准备。

36 染色体重塑：RNA聚合酶结合到的核小体不稳定，其撤掉2种（H2A-H2B）亚基，另一部分组蛋白则被移到聚合酶后面的自由DNA上，并在该处又重新形成核小体结构。

37 DNase I 高敏感点，在转录活跃的染色质区，经DNase I消化，可出现100-200 bp的DNA片段，其相应区域就称为DNase I 高敏感点。

38 高速泳动蛋白质：活性染色质中含有两种丰富的小分子非组蛋白，这些蛋白具有异常高的电荷，在凝胶电泳中移动快。活化的染色质中每10个核小体便结合1个HMG分子。

39 核小体通过甲基化修饰能够抑制染色体重塑，进而影响转录

40  真核生物可以通过基因丢失、基因扩增、基因重排以及DNA甲基化修饰等形式改变表达基因结构或构成，从而相应DNA区域基因表达。

41 在真核生物基因组构成中，DNA甲基化常常出现在CpG分布比较集中的区域，这个区域通常称为CpG岛

42 真核生物顺式作用元件，包括转录起始点、启动子、增强子、基因座控制区（LCR）、基质附着区（MAR）沉默子和绝缘子等类型

43 增强子（Enhencor）：指能使与其连锁的基因转录速率明显增加的DNA序列

44 绝缘子(Insulator)能够阻止激活或阻遏作用在染色体上的传递，使染色质的活性限定于一定区域内

45 真核生物反式作用因子，可以分为基本转录因子和特异转录因子两类。

46 真核生物转录因子三个结构域(domain)为DNA结合域、转录激活结构域及与其他转录因子结合的结构域

47 真核生物转录因子DNA结合域模式有螺旋-转角-螺旋（HTH）、螺旋-环-螺旋（HLH）、锌指结构（Zinc finger motif）以及亮氨酸拉链结构（Leucine zipper）等

48 RNA干扰(RNA interference RNA,  RNAi)，是指由与靶基因序列同源的双链RNA所诱导的特异性转录后基因沉默现象，其中起干扰作用的小分子RNA称为siRNA

第三部分

1 根据遗传重组特征，可以将DNA重组分为同源重组、位点专一性重组、异常重组和转座重组等类型。

2 同源重组，是指发生在非姐妹染色单体之间或同一染色体上含有同源序列的DNA片段间的重新组合。

3 根据交叉点或holiday结构的形成和拆分，可将同源重组分为前联会体阶段、联会体形成和Holiday结构拆分等三个阶段。

4 异常重组机制包括末端连接和链滑动。

5 转座子（Transposon）：在基因组上能够随机移动的DNA片段

6 转座： 指转座子在基因组上由一个位置移动到另一个位置的过程。

7 转座作用的遗传学效应，包括引起插入突变、引起宿主染色体DNA缺失或倒位以及使靶位点出现新的基因，促进生物进化。

8 原核生物转座子类型有IS (Insertion sequence, 插入序列)、复合转座子和TnA转座子等。

9 原核生物转座子转座有三种模式，分别为复制性转座、非复制性转座和保守型转座

10 真核生物逆转座子，转座模式为“复制 + 粘贴”。

11 逆转座子，是一类以RNA介导而完成转座的转座子，每进行一次转座其拷贝数便增加一个。

12 基因突变（Gene mutation），又可称为点突变，是在生长发育阶段，同一生物群体内单个或部分个体所发生的基因组核酸结构或序列改变。

13 基因突变能够产生的遗传效应类型有致死、增加或丧失某些功能、改变基因型而不改变表型。

14 概述基因突变与生物表观形态变化之间关系

•生物表型形态是由遗传因素和环境因素共同决定的

•要判定生物表型形态是否由基因突变引起的，其判定需要一定的专业知识或经验

•研究基因突变与表观形态变化之间关系，是诱变育种研究的重要内容，也是研究基因功能的一个重要方法

15 概述基因突变与重组相互关系

•重组，往往与DNA复制有密切关系，需要两个DNA分子片段或位点。 

•突变可以发生于任何细胞和任何生长发育时期，DNA复制错误也可以导致突变。

•部分DNA重组过程（如转座）可以导致基因突变，也可以对突变进行一定修复。

•重组和突变，都是同一生物群体遗传物质多样化的重要来源。 

15 按突变产生原因，可将基因突变分为自发突变和诱发突变

16 自发突变形成分子机制有DNA复制错误、DNA自发水解和脱氨、转座作用

17 能够产生诱发突变的因素有物理因素、化学因素以及生物因素。

18 突变率，是指每个细胞每一世代中发生基因突变的概率。

19 概述基因突变的特点

•突变范围：具有普遍性

•突变频率：基因自发突变率（10-6-10-9）很低。

•突变有害性和有利性：多数基因突变对生物体是有害的

•基因突变随机性：发生时期和部位

•基因突变不定向性：可形成多等位基因

•基因突变的重演性：

     （同一突变可在同种生物不同个体多次发生）

•基因突变的可逆性： 正向突变和回复突变（抑制突变）

20  常见的化学诱变剂种类有碱基类似物、烷化剂以及嵌合剂等。

21  增变基因，其基因突变能够引起整个基因组突变率明显上升

22  DNA损伤修复机制有：光复活、切除修复、重组修复、SOS修复、错配修复、DNA直接修复等。

23 SOS修复，是在DNA分子受损伤较大而且复制收到抑制时所出现的一种应急修复作用

第四部分

1 基因克隆：（gene cloning）或分子克隆,又称为重组ＤＮＡ技术，是应用酶学方法，在体外将不同来源的DNA分子通过酶切、连接等操作重新组装成杂合分子，并使之在适当的宿主细胞中进行扩增，形成大量的子代DNA分子的过程。

2克隆（clone）一指含有单一的DNA重组体的无性繁殖系，或指将DNA重组体引入宿主细胞建立无性繁殖系的过程(cloning)。

3一个完整的基因克隆所包含步骤依次为：获得待克隆的DNA片段（基因）；目的基因与载体在体外连接；重组DNA分子导入宿主细胞；筛选、鉴定阳性重组子；重组子的扩增与／或表达。

4 DNA重组技术常用的工具酶包括性核酸内切酶、DNA连接酶、DNA聚合酶、逆转录酶等

5载体(vector)是携带外源DNA进入宿主细胞进行扩增和表达的DNA,它们一般是通过改造质粒、噬菌体或病毒等构建的。按存在形式，可将载体分为质粒载体、λ噬菌体载体、粘粒载体、酵母人工染色体载体等。按用途，将载体分为克隆载体、表达载体、测序载体等

6 目的基因获取途径有：通过建立基因文库（基因组或者cDNA文库）分离靶基因、化学合成法制备DNA片段以及用PCR扩增分离基因片段

7 在重组DNA技术中，性内切酶、连接酶和载体分别被喻为剪刀、针线和运输工具

8 用蓝白斑筛选重组子，在单个白色菌落里大多都含有重组子，而蓝色菌落里则往往为空载体

9 外源DNA导入细菌常用的几种方法有转化、转导和转染；转化方法有熱击法和电转化法。

10 基因重组的主要目的是要使得目的基因在靶细胞中能得到高效表达，产生人们所需要的高产目的基因产物。基因工程技术的核心就是基因表达技术。

11 外源基因表达系统由基因表达载体和受体细胞构成。原核生物基因表达系统，有大肠杆菌表达系统、芽孢细胞表达系统等。真核生物基因表达系统，如酵母表达系统、植物细胞表达系统。

12 生物多样性，就是地球上所有的生物体及其所构成的综合体。其包括遗传多样性、物种多样性、生态系统多样性以及景观多样性等。其中，遗传多样性是生物多样性的核心。

13 遗传多样性，又称基因多样性，是种内的基因变化，包括种内两个隔离地理种群及单个种群内个体间的变异，通常从种群内多型基因的数目和百分数、每个多型基因的等位基因数、每个个体中多型基因的数目和百分数等三个方面来衡量。包括分子、细胞和个体三个水平上的遗传变异度。

14 种内遗传变异的主要来源为突变和重组。其中，突变是所有生物多样性产生的根源。

15 遗传标记 ( Genetic marker) 是指可追踪染色体、染色体某一节段或某个基因座在家系中传递的任何一种遗传特性，是表示遗传多样性的手段。其具有可遗传性和可识别性两个基本特征。到目前为止，遗传标记主要有4种类型，即形态标记、细胞学标记、生化标记和分子标记。

16 分子标记，狭义是指DNA分子标记 (DNA molecular markers) ，其是指基于DNA分子构象或序列多态性建立起来的一类遗传标记，是指能反映生物个体或种群间基因中某种差异特征的DNA片段。

17 相对其他种类遗传标记，DNA标记具有明显优点是：

●可靠便捷，其直接以DNA形式表现，相应标记检测受季节、环境以及表达状况较少

●数量多，可检测位点几乎是无限的

●多态性高，各个变异位点组合使得DNA多态性异常丰富

●表现性为中性，不影响目标基因性状表达

●许多标记具有共显性，能够区分纯合体和杂合体

18 在植物上，DNA分子标记可以应用于遗传图谱构建、种质资源遗传多样性分析与管理、种质鉴定、重要农艺性状基因定位与图位克隆、转基因植物坚定和分子标记辅助选择育种等多个方面。

19 DNA分子标记多态性的分子基础为酶切位点（或PCR引物结合位点）突变、酶切位点（或PCR引物结合位点）插入或缺失、酶切位点（或PCR引物结合位点）之间串联重复序列单元数目改变以及单核苷酸突变等。

20 比较常用的分子标记主要有SSR（Simple sequence repeat, 简单序列重复）、AFLP（Amplified fragment length polymorphism, 扩增片段长度多态性）、ISSR（Inter-simple sequence repeat，简单序列重复区间）等。随着近些年测序技术迅猛发展，SNP（Single nucleotide polymorphism， 单核苷酸多态性）标记研究也日益兴盛。

21 目前基因表达分析应用的技术有Northern杂交、基因芯片和 Q-PCR。而应用最为广泛的是Q-PCR。

22 Q-PCR，又称实时定量PCR，其通过分析Ct值和溶解曲线，来比较不同样品基因表达量（即产生mRNA的拷贝数）差异。其Ct值越大，相应样品基因表达量就越小。

23新一代测序技术，又称为高通量测序，已产生有454 焦磷酸测序、Illumina测序 、SOLiD测序以及Helicos测序等测序平台。其优势有测序快、产生数据量大、成本相对较低等。

24新一代测序主要应用有：在DNA水平上进行全基因组测序、基因组重测序和宏基因组研究等；在RNA水平上进行转录组测序和小RNA测序分析等；还有表观遗传学研究等。

25 转录组，是指在特定发育时期或者经特殊处理后的特定组织所形成的转录产物总和。