显微镜原理与维修

使用无限远光学系统的显微镜主要由物镜、管镜和目镜组成。标本经物镜和管镜放大后，形成放大倒立的实象；实象经目镜再次放大后，形成放大的虚象。

标本（AB）在物镜（Lo）焦点上，通过物镜（Lo）和管镜（Le）在象方形成放大倒立的实象（A’B’）；靠近人眼一方的目镜（Le）对中间象（A’B’）再次放大，在明视距离（对人眼来说约为250mm）处形成一个虚象(A”B”)。

人眼通过显微镜所观察到的象就是一个被放大了的虚象A”B”。

使用注意事项

使用之前，请详细阅读使用说明书，熟悉显微镜各部件功能，严格按操作步骤执行。

不要随意取下目镜和物镜，以防止尘土落进目镜筒和物镜内部；也不要任意拆卸各种部件，以免损坏。

显微镜属于精密仪器，不要随意搬动，避免震动。

每次使用完油镜之后，用镜头纸和清洁液（乙醚：无水乙醇＝7：3）清洗物镜。

显微镜每次使用完之后，请将光亮度调节旋钮置于最小位置，避免下次开启时烧坏灯泡。

显微镜的使用环境应保持清洁、干燥、防尘，避免光路系统长霉，影响观察。

维护保养

清洁用品

a.清洗液(乙醚：无水乙醇＝7：3)b.吹气球c.镜头纸d.木棒

擦拭方法

a.在擦拭各光学表面之前，先清洗整台显微镜，再用吹气球除去表面的尘粒，避免擦拭时刮伤光学表面。

b.根据不同大小的光学表面，决定用手或木棒擦拭（参考下图）。

c.擦拭镜头和滤光片的基本操作是从部位擦起，逆时针方向旋转，逐步向边缘擦拭。

擦拭部位

清洁显微镜表面及载物台，再清洗各光学部位

① 视场透镜 ② 聚光镜 ③ 物镜 ④ 目镜

激光共聚焦显微镜原理

激光共聚焦扫描显微技术（Confocal laser scanning microscopy）是一种高分辨率的显微成像技术。普通的荧光光学显微镜在对较厚的标本（例如细胞）进行观察时，来自观察点邻近区域的荧光会对结构的分辨率形成较大的干扰。共聚焦显微技术的关键点在于，每次只对空间上的一个点（焦点）进行成像，再通过计算机控制的一点一点的扫描形成标本的二维或者三维图象。在此过程中，来自焦点以外的光信号不会对图像形成干扰，从而大大提高了显微图象的清晰度和细节分辨能力。

图1. 共聚焦显微镜简化原理图

图1是一般共聚焦显微镜的工作原理示意图。用于激发荧光的激光束(Laser)透过入射小孔(light source pinhole)被二向色镜(Dichroic mirror)反射，通过显微物镜(Objective lens)汇聚后入射于待观察的标本(specimen)内部焦点(focal point)处。激光照射所产生的荧光(fluorescence light)和少量反射激光一起，被物镜重新收集后送往二向色镜。其中携带图像信息的荧光由于波长比较长，直接通过二向色镜并透过出射小孔(Detection pinhole)到达光电探测器(Detector)（通常是光电倍增管（PMT）或是雪崩光电二极管（APD）），变成电信号后送入计算机。而由于二向色镜的分光作用，残余的激光则被二向色镜反射，不会被探测到。

图2. 探测针孔的作用示意图

图2解释了出射小孔所起到的作用：只有焦平面上的点所发出的光才能透过出射小孔；焦平面以外的点所发出的光线在出射小孔平面是离焦的，绝大部分无法通过中心的小孔。因此，焦平面上的观察目标点呈现亮色，而非观察点则作为背景呈现黑色，反差增加，图像清晰。在成像过程中，出射小孔的位置始终与显微物镜的焦点(focal point)是一一对应的关系（共轭conjugate）,因而被称为共聚焦（con-focal）显微技术。 共聚焦显微技术是由美国科学家马文•闵斯基(Marvin Minsky)发明的；他于1957年就为该技术申请了专利。但是直到八十年代后期，由于激光研究的长足进步，才使得激光共聚焦扫描显微技术（CLSM）成为了一种成熟的技术。 

当今的激光共聚焦显微镜已经发展为一种结合了激光技术，显微光学，自动控制和图像处理等多种尖端科研成果的高技术工具。是现代微观研究领域不可缺少的利器之一。Nikon秉承“信赖与创造”的一贯企业理念，正在为业界提供世界领先水平的共聚焦显微镜系统产品。

下列出了生物显微镜使用中常见的问题及解决办法，如您使用上述方法仍无法排除故障，请与我们联系，联系方式见“联系我们”。

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