口蹄疫研究汇总

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的人兽共患的一种急性、热性、高度接触性传染病，其临诊特征是在口腔黏膜、四肢下端及乳房等处皮肤形成水疱和烂斑。该病传播迅速，流行面广，成年动物多取良性经过，幼龄动物多因心肌受损而死亡率较高。

本病广泛流行于世界各地。由于本病使动物及其产品流通和国际贸易受到，造成了巨大的经济损失，故被各国及国际组织所重视，列为全球各国共同商定扑灭的头号法定传染病。世界动物卫生组织（OIE）将本病列为A类动物疫病名单之首。随着国际贸易日趋增加，物资交流和国际交往越来越频繁，给本病的预防和控制增加了难度，因此，世界各国都花费大量人力、物力和财力来研究、控制和消灭本病。

本病虽多呈良性经过，但感染谱广，流行快，往往造成大流行，不易控制和消灭，降低生产性能，并且感染人。我国民间俗称本病为“口疮”、“蹄癀”。

【病原】

口蹄疫病毒（Foot-and-mouth disease virus,FMDV）属于微RNA病毒科（Picornaviridae）中的口蹄疫病毒属（Aphthovirus），是RNA病毒中最小的一个。病毒粒子为二十面体对称结构，呈球形或六角形，直径为17～20nm，无囊膜。内部为单股线状正义RNA，占全病毒的质量为31.8%，决定病毒的感染性和遗传性；外部为蛋白质，占病毒的质量为68.5%，决定其抗原性、免疫性和血清学反应能力，并保护的核糖核酸不受外界核糖核酸酶等的影响。

口蹄疫病毒基因组由5′非翻译区（5′-UTR）、3′非翻译区（3′-UTR）、开放阅读框（ORF）和poly（A）尾组成，全长大约8500个核苷酸。其编码4种主要多肽：VP1 、VP2、VP3和VP4，还编码两种次要的多肽，编码结构蛋白VP4、 VP3 、VP2、 VP1的基因分别命名为1A、1B、1C、1D 。VP1～VP3位于衣壳表面，组成核衣壳蛋白亚单位，VP1是决定病毒抗原性的主要成分，VP4位于衣壳内部，与RNA紧密结合而构成病毒粒子的内部成分。在4种结构蛋白质中， VP1诱导中和抗体并与抗感染免疫有关。

在口蹄疫病毒感染的细胞培养液中，有大小不同的4种粒子。最大的粒子为完整病毒 ，其直径为（23±2）nm ，沉降系数为146S，具有感染性和免疫原性；第二种为不含RNA的空衣壳，其直径为21nm ，沉降系数为75S，具有良好的型特异性和免疫原性，但没有感染性；第三种为衣壳蛋白裂解后的壳微体（亚单位），其直径为7nm ，沉降系数为12S，无RNA，无感染性而有抗原性；第四种为病毒感染相关抗原（VIA），沉降系数为4.5S，是一种不具有活性的RNA聚合酶，当病毒粒子进入细胞，经细胞蛋白酶激活才具有酶活性，能诱发机体产生群特异性抗体。

口蹄疫病毒具有多型性，易变异的特点。根据其血清学特性，目前可分为7个血清型，即A、 O、 C、 SAT1、 SAT2、 SAT3（南非1，2，3型）及Asia I型（亚洲I型）。各血清型间无交叉免疫现象，但各型在发病临诊症状方面的表现却没有什么不同。每一个血清型又包含若干个亚型，同型各个亚型之间也仅有部分交叉免疫性。口蹄疫病毒在流行过程中及经过免疫的动物体均容易发生变异，即抗原漂移，故口蹄疫病毒常有新的亚型出现。根据世界口蹄疫中心公布，口蹄疫亚型已达到80多个，而且还会有新的亚型出现。病毒的这种特性给口蹄疫的防制带来了许多困难。我国主要是A、O和亚洲I型，欧洲主要是A、O型，均以O型多见。

口蹄疫病毒可用多种哺乳动物细胞系培养，如犊牛肾细胞、仔猪肾细胞、仓鼠肾细胞等几十种细胞，并产生细胞病理变化，最常用的是乳鼠、豚鼠、乳仓鼠肾传代细胞。由于乳仓鼠肾传代细胞对口蹄疫病毒高度易感，故现在常用于单层细胞培养和深层悬浮培养以供研究或生产疫苗。鸡胚也可以用于分离培养及致弱病毒。有些鸡胚适应毒株和雏鸡适应毒株对牛的致病力显著减弱。

口蹄疫病毒人工接种很容易使牛感染，将病料皮内接种于舌部，可于10～12h 内出现水疱，在20～24 h表现发热和病毒血症，在2～4d 内蹄叉出现继发性水疱。豚鼠是常用的实验动物，在后肢跖部皮内接种或刺划，常在24～48h 后于接种部位形成原发性水疱，于感染后2～5d 可在口腔等处出现继发性水疱。乳鼠对本病毒非常敏感，是最好的实验动物，一般用3～5日龄（也可用7～10日龄）的豚鼠，皮下或腹腔接种，经10～14h表现呼吸急促，四肢和全身麻痹等临诊症状，于16～30h内死亡。其它动物如犬、 猫 、仓鼠、大鼠、家兔、家禽等人工接种亦可感染。

口蹄疫病毒对外界环境的抵抗力很强，耐干燥。在自然条件下，含毒组织及污染的饲料、饮水、饲草、皮毛及土壤等所含病毒在数日乃至数周内仍具有感染性。病毒低温下十分稳定，在-50℃～-70℃可保存数年之久，在50%甘油生理盐水中于5℃能存活1年以上。但高温和直射阳光（紫外线）对病毒有杀灭作用，紫外线能使病毒RNA的尿嘧啶形成二聚物，致使病毒被迅速灭活。病毒对酸和碱都特别敏感，在pH3.0和pH9.0以上的缓冲液中，病毒感染性将瞬间消失，2%～4%氢氧化钠、3%～5%溶液、5%氨水、0.2%～0.5%过氧乙酸或5%次氯酸钠等均为口蹄疫病毒良好的消毒剂。食盐对病毒无杀灭作用，有机溶剂及一些去污剂对病毒作用不大。骨髓、内脏及淋巴结内的病毒因产酸不良而能存活多年。 

【流行病学】

自然条件下口蹄疫病毒可感染多种动物，偶蹄目动物易感性最高，易感性的高低顺序依次为黄牛、奶牛、牦牛、水牛、猪、羊、骆驼。在野生动物中，黄羊、麝、鹿、野牛、野猪、驼羊、羚羊、野山羊等均可感染。实验动物中以豚鼠、乳鼠、乳兔最敏感，幼龄动物易感性大于老龄动物。人对本病也有易感性，儿童发病严重，成人较轻。

患病动物及隐性带毒动物是本病最主要的传染源，发病初期的病畜是最危险的传染源，因为病状出现后的头几天，排毒量最多，毒力最强。在恢复期排毒量逐步减少。病牛以舌面水疱皮的含毒量最多，其次为粪、尿、乳和精液。病猪则以破溃的蹄部水疱皮含毒量最高，约为牛舌面水疱皮含毒量的10倍，病猪的排毒量远远超过牛羊，因此人们认为猪在本病的传播上具有重要的作用。病愈后的动物在康复期带毒时间很长，且病毒含量有波动，抗体也随之而波动。从带毒牛分离的强毒或弱毒对猪的毒力比对牛更强些。带毒牛所排出的病毒，在猪群中通过增强毒力后，可能再传染牛而引起流行。病毒在带毒牛体内可发生抗原变异，产生新的亚型。

本病毒可经多途径传播，当病畜和健康畜在一个厩舍或牧群相处时，病毒常借助于直接接触方式传播，这种传播方式在牧区大群放牧与密集饲养条件下较为常见，但更多的是间接接触传播，但传播机制尚不清楚。病毒携带者（或称持续感染者）为感染后咽喉带毒超过28天的动物。目前，学术界主流观点认为，猪不是病毒携带者；牛的带毒期通常不超过6个月，少数可长达3年，非洲水牛有的可带毒5年；水牛、绵羊和山羊，携带口蹄疫病毒通常不超过数月。空气也是一种重要的传播媒介，病毒能随风引起远距离的跳跃式传播，病毒常通过消化道和呼吸道和损伤的皮肤、黏膜而感染。

口蹄疫是一种传染性极强的传染病，一经发生往往呈流行性，在牧区，多呈现大流行，疫情一旦发生，可随牲畜的流动迅速蔓延，经过一定时期后疫情才逐渐平息。口蹄疫或从一个地区，一个国家传到另一个国家或地区。多系输入带毒产品和家畜所致。也可呈直线式流行。

口蹄疫病毒对成年动物的死亡率通常低于5%，但幼畜因心肌炎其死亡率有时高达50%以上。长期存在本病的地区其流行常表现周期性，每隔3—5年大爆发一次。发生季节随地区而异，牧区常表现为秋末开始，冬季加剧，春季减轻，夏季平息；而农区季节性不明显。

【发病机理】

病毒侵入机体后，首先在侵入部位的上皮细胞内生长繁殖，引起浆液渗出而形成原发性水疱（第一期水疱），通常不易发现。1～3d 后进入血液形成病毒血症，导致体温升高和全身临诊症状，在病毒血症期间，病毒还可侵入心肌和骨骼肌中，常伴随细菌（非溶血性链球菌和小球菌）并发和继发感染，引起变性和炎性变化，致使心肌坏死而出现灰白色斑点和条纹，称虎斑心或虎纹心，病幼畜多以急性心肌炎而致死。病毒随血液分布到所嗜好的部位（如口腔黏膜、蹄部、乳房、皮肤组织）继续繁殖，引起局部组织的淋巴管炎，造成局部淋巴淤滞、淋巴栓，若淋巴液渗出淋巴管外则形成继发性水疱（第二期水疱）。水疱不断地发展，融合乃至破裂，此时患畜体温恢复正常，血液中病毒量减少乃至消失，但逐渐从乳、粪、尿、泪及涎水中排毒。此后病畜进入恢复期，多数病例逐渐好转。但有些吮乳动物常因病毒危害心脏导致急性心肌炎、心肌变性坏死而死亡。

【临诊症状】

不同动物发病后的临诊症状基本相似，但由于病毒的数量和毒力以及感染门户的不同，潜伏期的长短和临诊症状也不完全一致。

牛  潜伏期一般2～7d，最长可达14d。病牛体温升高达40～41℃，滞留8-48h，食欲不振，精神沉郁，闭口，流涎，开口时有吸吮声。1d后唇内、齿龈、口腔、舌面和颊部黏膜发生黄豆大、后融合至核桃大的水疱，由淡黄转灰白，口温高，口角流涎增多，呈白色泡沫状，常常挂满嘴边似胡须，采食、反刍完全停止。水疱约经1d后破溃形成红色糜烂，水疱破裂后，体温降至正常，糜烂逐渐愈合，全身临诊症状逐渐好转。如有细菌感染，糜烂加深，发生溃疡，愈合后形成瘢痕。有时并发纤维蛋白性坏死性口膜炎、胃肠炎。也可在鼻咽部形成水疱，引起呼吸障碍和咳嗽。在口腔发生水疱的同时或稍后，趾间及蹄冠的柔软皮肤上表现红肿、疼痛，迅速发生水疱，并很快破溃，出现糜烂，或干燥结成硬痂，然后逐渐愈合。若病牛衰弱，或饲养管理不当，糜烂部位可能发生继发感染化脓、坏死，病畜站立不稳，跛行，甚至蹄匣脱落、变形，卧地不起。乳头皮肤有时也可出现水疱，很快破裂形成烂斑。如涉及乳腺引起乳房炎，奶牛产奶量下降，有时高达75 %，甚至泌乳停止乃至不能恢复。乳房病理变化见于纯种牛，黄牛较少发生。

本病一般多呈良性经过，约经1周即可痊愈。如果蹄部出现病理变化时，则病期可延至2～3周或更久。病死率很低，一般不超过3%，但在某些情况下，当水疱病理变化逐渐痊愈，病牛趋向恢复时，病情可突然恶化：病牛全身虚弱，肌肉发抖，特别是心跳加快，节律失调，反刍停止，食欲废绝，行走摇摆，站立不稳，因心脏麻痹而突然倒地死亡。这种病型称为恶性口蹄疫，病死率高达20～50%，主要是病毒侵害心肌所致，尤以犊牛多见。孕牛可发生流产。

吮乳犊牛患病时，水疱临诊症状不明显，主要表现为出血性肠炎和心肌麻痹，死亡率很高。病愈后可获得一年左右的免疫力。

羊  潜伏期一周左右，病状与牛大致相同，但感染率较低。绵羊多于蹄部、山羊多于口腔形成水疱，呈弥漫性口膜炎，水疱发生于硬腭和舌面，孕羊流产，羔羊有时有出血性胃肠炎，常因心肌炎而死亡。

猪 由于猪的品种和病毒的品系关系，症状很不一致。潜伏期1～2d或3-5d，临诊症状极典型，病猪以蹄部水疱为主要特征，病初体温升高达40～41℃，精神沉郁，食欲不振或废绝。口黏膜（包括舌、唇、齿龈、咽、腭）形成小水疱或烂斑。1d左右出现典型临诊症状：蹄冠、蹄叉、蹄踵、附蹄、鼻端等部出现局部发红，微热，敏感等临诊症状，不久逐渐形成米粒至黄豆大水疱，水疱破裂后表面出血，形成糜烂，如无细菌感染，一周左右痊愈。如有继发感染，影响蹄叶、蹄壳，严重者蹄匣脱落，患肢不能着地，常卧地不起或跪行。病猪鼻端、乳房也常见到烂斑，尤其是哺乳母猪，乳头上的皮肤病灶较为常见，但也见于鼻端。有时引起孕猪流产，乳房炎及慢性蹄变形。若哺乳母猪乳头有水疱，则整窝小猪发病，多呈急性胃肠炎和心肌炎而突然死亡，死亡率可达100%。病程稍长者，也可见到口腔（齿龈、唇、舌等）及鼻面上有水疱和糜烂。成年猪也有死亡。

骆驼  以老、弱、幼驼发病较多。临诊症状与牛相似，发病率较牛低。主要是在口腔内和蹄部发生水疱，水疱破裂后，有糜烂和溃疡，有的口腔流涎，挂满口角与下唇，拉成线状，病驼不吃，消瘦，随后沿蹄冠出现大小不一的水疱，大的如蚕豆，小的如樱桃，有时蔓延到蹄叉，水疱破裂后，由于污染而化脓，溃疡加深，致使蹄踵角质部与肌肉组织脱离，有的成片脱落或一次性整个脱落，称“脱靴”或“脱掌”。角质新生较慢，需1个月以上。

鹿  与牛相同。在口腔内有散在的水疱，很快破裂形成糜烂，其上有凝乳样的被覆物。病鹿体温40～40.6℃， 有时可持续6～8d，口腔有病理变化时，则大量流涎，四肢患病时，呈现跛行，严重者蹄壳脱落，在无并发症的情况下，经10d左右即可痊愈。

【病理变化】

患病动物的口腔、蹄部、乳房、咽喉、气管、支气管和胃黏膜可见到水疱、烂斑和溃疡，上面覆盖有黑棕色的痂块。反刍动物真胃和大小肠黏膜可见出血性炎症。心包膜有弥漫性及点状出血，心肌有灰白色或淡黄色的斑点或条纹，称为“虎斑心”。心肌松软似煮过的肉。由于心肌纤维的变性、坏死、溶解释放出有毒分解产物而使病畜致死。病理组织学检查可见皮肤的棘细胞肿大呈球形，间桥明显，棘细胞渗出明显乃至溶解。心肌细胞变性、坏死、溶解。

【诊断】

根据流行病学、临诊症状和病理剖检特点可作出初步诊断，确诊需要进行实验室诊断。

病毒分离与鉴定  一般采用组织培养、实验动物和鸡胚三种方法。取水疱皮或水疱液用PBS液制备混悬浸出液，或直接取水疱液接种BHK细胞、LBRS细胞或猪甲状腺细胞进行病毒分离培养。病程长者可取骨髓、淋巴液接种豚鼠肾传代细胞或经绒毛尿囊膜接种9～11日龄鸡胚或3～4日龄乳鼠。 

血清学诊断  为了确定流行毒株的血清型和亚型，可用水疱皮或水疱液进行补体结合实验（CFT）或微量补体结合实验进行鉴定，或用恢复期动物的血清作乳鼠中和实验、免疫扩散沉淀实验（IDPT）、免疫荧光抗体实验（IFA）、中和试验（NT）。目前已经使用间接夹心ELISA法逐步取代了CFT法，直接鉴定病毒的亚型，并且能同时检测水疱性口炎病毒（VSV）和猪水疱病病毒（SVDV）。

随着分子生物学技术的迅猛发展，口蹄疫的诊断技术也得到了快速发展，主要有核酸杂交技术、聚合酶链式反应以及核酸序列分析，使口蹄疫的诊断更加简便、快捷、特异和敏感。 

鉴别诊断  口蹄疫与牛瘟、牛恶性卡他热、水疱性口炎、猪水疱病、猪水疱性疹等疫病临诊症状相似，应当注意进行鉴别（见附表1、3和13）。 

【防治措施】

一般措施：加强饲养管理、保持畜舍卫生、经常进行消毒、对购进的动物及其产品、饲料、生物制品等进行严格检疫、平时减少机体的应激反应。  

预防接种：在疫区最好用与当地流行的相同血清型、亚型的减毒活苗或灭能苗进行免疫接种。许多国家采用牛、猪口蹄疫灭活苗来预防口蹄疫，免疫效果较好。对疫区和受威胁区内的动物进行免疫接种，在受威胁区周围建立免疫带以防疫情扩散。康复血清或高免血液用于疫区和受威胁区家畜，可控制疫情和保护幼畜。一般牛注射5mL，猪3mL，每年免疫2～4次，同型苗免疫保护期一年。

消毒  粪便堆积发酵处理或用5%氨水消毒；畜舍、场地和用具以2～4 %烧碱液、10 %石灰乳、0.2～0.5%过氧乙酸或1～2 %喷洒消毒；毛、皮张用环氧乙烷、溴化甲烷或甲醛气体消毒，肉品以2 %乳酸或自然熟化产酸处理。

治疗措施  家畜发生口蹄疫后，一般不充许治疗，而应采取扑杀措施。但在特殊情况下，如某些珍贵种用动物等，可在严格隔离的条件下予以治疗。为了促进病畜早日痊愈，缩短病程，特别是为了防止继发感染的发生和死亡，应及时对病畜进行治疗。对病牛要精心饲养，加强护理，给予柔软的饲草，对病状较重，几天不能吃的病牛，应喂以麸糠稀粥，米汤或其他稀粥状食物，防止因过度饥饿使病情恶化而引起死亡。畜舍应保持清洁、通风、干燥、暖和，多垫软草，多给饮水。

口腔可用清水、食醋或0.1%高锰酸钾冲洗，糜烂面上可涂以1～2%明矾或碘酊甘油（碘7g、碘化钾5g、酒精100mL，溶解后加入甘油10mL ）或冰硼散（冰片15g、硼砂150g、芒硝18g ，共为末）。

蹄部可用3%臭药水或来苏儿洗涤，擦干后涂松馏油或鱼石脂软膏等，再用绷带包扎。

乳房可用肥皂水或2～3%硼酸水洗涤，然后涂以青霉素软膏或其他防腐软膏，定期将奶挤出以防发生乳房炎。

恶性口蹄疫病畜除局部治疗外，可用强心剂，如安那加，葡萄糖盐水等。用结晶樟脑口服，每天2次，每次5～8g，可收良效。

扑灭措施  无病国家一旦暴发本病应采取屠宰病畜，消灭疫源；已消灭了本病的国家通常采取禁止从有病国家输入活畜或动物产品，杜绝疫源传入；有本病的国家或地区，多采取以检疫诊断为中心的综合防制措施，一旦发现疫情，应按“早、快、严、小”的原则，立即实现封锁、隔离、检疫、消毒等措施，迅速通报疫情，查源灭源，并对易感畜群进行预防接种，以及时拔除疫点。在疫点内最后一头病畜痊愈或屠宰后14d，未再出现新的病例，经全面消毒后可解除封锁。

【公共卫生】

人对口蹄疫病毒仅有轻度的易感性，人在很早以前就有许多感染口蹄疫的病例报道，但直到用人的病料对牛和豚鼠感染成功才被证实。从健康人的血清中也查到了特异的抗体，说明口蹄疫在人还可呈无临诊症状经过。人的口蹄疫有时可呈地方性流行。感染主要是由于饮食病牛奶汁，或通过挤奶、处理病畜而接触感染，创伤也可感染。

人一般经伤口及口感染，潜伏期3～6d，短者1d。多种病畜均可传染人。常突然发病，患病后主要临诊症状是体温升高，口腔发热，发干，呕吐，唇、齿龈、舌和颊部黏膜潮红，出现水疱。皮肤上的水疱多见于指尖，指甲基部，有时也见于手掌、足趾、鼻翼和面部。水疱破裂后形成薄痂，逐渐愈合，有时形成溃疡。

有的病人表现头痛，晕眩，四肢和背部疼痛，胃肠痉挛，呕吐，咽喉痛，吞咽困难，腹泻，循环紊乱和高度虚弱等临诊症状。

一般病程约2～3周，预后良好。幼儿严重，可并发胃肠炎、神经炎和心肌炎等。

预防人的口蹄疫，主要依靠个人自身防护，如不吃生奶，接触病畜后立即洗手消毒，防止病畜的分泌物和排泄物落入口鼻和眼结膜，污染的衣物及时作卫生处理等。 

思考题

1） 口蹄疫病毒有哪些特点？口蹄疫在流行病学上有哪些重要特点？

2） 试述牛口蹄疫的典型症状？

3） 如何预防猪口蹄疫？发生口蹄疫后应采取哪些扑灭措施？