土壤中农药残留量的测定——气相色谱法

一、目的和要求

（1）了解从土样中提取有机氯农药的方法。

（2）掌握气象色谱法的定性、定量方法。

（3）通过实验，初步了解气象色谱仪的结构及操作技术。

二、原理

六六六农药有7种顺、反异构体（也称甲体、乙体、丙体、丁体、戊体、己体和庚体）。一般只检测前4种异构体。它们的物理化学性质稳定，不易分解，且具有水溶性低、脂溶性高、在有机溶剂中分配系数大的特点，因此，本法采用的有机溶剂提取，浓硫酸纯化以消除或减少对分析的干扰，然后用电子捕获检测器进行检测。用标准化合物的保留时间定性，用峰高外标法定量。

三、仪器与试剂

（1）附有电子捕获检测器的气象色谱仪。

（2）水分快速测定仪。

（3）250mL脂肪提取器。

（4）微量注射器。

（5）石油醚。沸程为60~90℃，重蒸馏，色谱进样无干扰峰。

（6）丙酮。重蒸馏，色谱进样无干扰峰。

（7）无水硫酸钠。300℃烘4h后，干燥备用。

（8）2%无水硫酸钠。

（9）30~80木硅藻土（celite）。

（10）脱脂棉。用石油醚回流4h后，干燥备用。

（11）滤纸筒。适当大小滤纸用石油醚回流4h后，干燥做成筒状。

（12）六六六、六六六、六六六、六六六标准液。将色谱纯六六六、六六六、六六六、六六六用石油醚配制成200mg/L的储备液，石油醚配制成适当浓度的使用标准液。注意在配制六六六标准液时，先用少量苯溶液。

四、实验步骤

1.土样的提取

称取经风干过60目筛的土壤20.00g（另取10.00g测定水分含量）置于小烧杯中，加2mL水，4g硅藻土，充分混合后，全部移入滤纸筒内，上部盖一滤纸，移入脂肪提取器中。加入80mL（1:1）石油醚—丙酮混合液浸泡12h后，加热回流提取4h。回流结束后，使脂肪提取器上部有积聚的溶剂。待冷却后将提取液移入500mL分液漏斗中，用脂肪提取器上部溶液分3次冲洗提取器烧杯，将洗涤液并入分液漏斗中。向分液漏斗中加入300mL2%硫酸钠水溶液，振摇2min，静止分层后，弃去下层丙酮水溶液，上层石油醚提取液供纯化用。

2.纯化

在盛有石油醚提取液的分液漏斗中，加入6mL浓硫酸，开始轻轻振摇，并不断将分液漏斗中因受热释放的气体放出。以防压力太大引起爆炸，然后剧烈振摇1min。静止分层后弃去下部硫酸层。用硫酸纯化数次，视提取液中杂质多少而定，一般1~3次，然后加入100mL2%硫酸钠水溶液，振摇洗去石油醚中残存的硫酸。静止分层后，弃去下部水相。上层石油醚提取液通过铺有1cm厚的无水硫酸钠层的漏斗（漏斗下部用脱脂棉支撑无水硫酸钠），脱水后的石油醚收集于50mL容量瓶中，无水硫酸钠层用少量石油醚洗涤2~3次。洗涤液也收集于上述容量瓶中，加石油醚稀释至刻度，供色谱测定。

3.气象色谱测定

1）分析条件

检测器：电子捕获检测器

色谱柱;DB-5毛细管柱，长30cm。

柱箱温度：初始温度为60℃，以20℃/min升温至180℃，再以10℃/min升温速率升至240℃。

汽化室温度：250℃。

检测器温度：300℃。

载气：氦气。

2）色谱分析

首先用微量进样器从进口定量注入各六六六标准样，各2次。记录进样量、保留时间及峰高或面积，计算时用平均值。再用同样的方法对样品进行进样分析，并进行记录。

五、数据处理

（1）以表格形式记录色谱的操作条件和标准样测试结果。

（2）以表格形式记录土样测定结果，并按下下列公式计算六六六各异构体的量。

式中：——样品中六六六的含量，

 ——样品中相应峰的高度，mm；

 ——标准溶液峰高，mm；

——标准溶液浓度，；

——标准溶液进样量，；

 ——样品进样量，；

 ——样品提取液的体积相当于样品的质量，，本法中

——相应化合物的添加回收率，%；

 ——土壤中水分的质量百分数，%；

六、注意事项

（1）进样量要准确，进样动作要迅速，每次进样后，注射器一定要用石油醚洗净，最好用氮气流冲干净，避免样品互相污染，影响测定结果。

（2）纯化时出现乳化现象可采用过滤、离心或反复滴液的方法解决。

（3）如果土样中六六六异构体浓度较低，则纯化的石油醚提取液用K-D液浓缩器浓缩至相应体积。

（4）相应化合物的添加回收率，可用相应浓度的该化合物表样添加到土样中测定。