实验四：土壤氨态氮的测定

一、实验方法及目的

采用2mol•L-1KCl浸提—纳氏比色法测定土壤氨态氮；掌握土壤氨态氮的测定方法及分光光度法。

二、实验原理

2mol•L-1KCl溶液浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的NH4+及水溶性NH4+浸提出来。土壤浸提液中的铵态氮与碘化汞和碘化钾的碱性溶液反应生成淡红棕色胶态化合物，此溶液在较宽波长内具有强烈吸收，在含氮0.025～2mol•L-1的范围内，吸光度与铵态氮含量成正比，可用比色法测定，测量波长为420nm。 

三、实验仪器与药品

1仪器：多用调速振荡器，分光光度计。

2试剂：

1）2mol•L-1KCl溶液：称取149.12gKCl溶于与1L水中；

2）称取16g氢氧化钠，溶于50ml水中，充分冷却至室温；另称取7g碘化钾和10g碘化汞溶于水，然后将此溶液在搅拌下徐徐注入氢氧化钠溶液中，用水稀释至100ml，贮于聚乙烯瓶中，密塞保存。

3）酒石酸钾钠溶液:称取50g酒石酸钾钠溶于100ml水中，加热煮沸以除去氨，放冷，定容至100ml。 

四、实验步骤

1）新鲜土样含水率测定（称取土样10g）

2）浸提：称取5g新鲜土样准确到0.01g，置于50mL离心管中，加入2mol•L-1KCl溶液25mL，塞紧塞子，在多用调速振荡器上振荡30mim。取出静置，待土壤—氯化钾悬浊液稍微澄清后，用中速滤纸进行过滤。如果不能在24h内进行，用滤纸过滤悬浊液，滤液储存在冰箱中备用。

    3）比色：吸取土壤浸出液1mL-5mL(含NH4+-N2µg～25µg)放入25mL比色管中，用去离子水定容至25ml标线处，然后先加入酒石酸钾钠溶液0.5mL、再加入纳氏试剂0.75mL，摇匀。用1cm比色槽在420nm波长处（或红色滤光片）进行比色，读取吸光度。

    4）工作曲线 分别吸取0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、6.00、8.00、12.00、16.00、20.00mL NH4+-N标准液于50mL比色管中，同3）步骤进行比色测定。

氨态氮标准溶液吸光度值

氨态氮溶液标准曲线

五、实验结果

1）新鲜土壤样品含水率

含水率=(铝盒+烘干土样重-铝盒重)*100/铝盒+土样重-铝盒重

土壤中氨态氮含量（mg·kg-1）=（5.3405×吸光度-0.002）×0.025×（25/V）×1000×含水率/m

式中：V——取滤液体积（ml）；m——新鲜土壤质量（g）

结果记录表

1) 氨态氮显色时间为15min；

2）含水率测定为105℃下烘3-4个小时。