基因工程复习填空题

1、基因工程运用了_________和_________等技术，赋予生物以新的遗传特性。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做_________技术。

2、基因工程操作的基本工具有_________、_________和_________

3、酶主要是从_________中分离纯化出来的，它们能识别_________中特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的_________键断开。DNA分子经酶切割后产生的DNA片段通常有两种形式，即_________和_________。

4、DNA连接酶根据来源不同，可以分为两类，即_________和_________。

5、将外源基因送入细胞中需要载体。常用载体质粒的本质是_________。作为载体要至少要具备三个条件：第一要能够_________，以便能够大量的扩增；第二要__________________

_______________________以便外源DNA片段插入其中；第三要__________________以供重组DNA的鉴定和选择。基因工程中使用的载体还有__________________。

6、基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：第一__________________；第二_________

_________；第三__________________；第四步__________________。

7、获取目的基因的方法：当不知道目的基因的序列时用_______________法；如果基因比较小，核苷酸序列又已知，可以用_________________；如果已知目的基因的一部分序列，要对该目的基因大量扩增时则可以用_________。

8、PCR技术是_________的缩写，其原理是________________，前提条件是_______________，

需要的酶是__________________。

9、基因工程的核心是__________________。构建基因表达载体的目的是__________________

__________________。如果将目的基因直接导入受体细胞则会出现的结果是______________

__________________。一个基因表达载体组成除了目的基因以外，还必须有_________、_________和_________等。构建时，需要将目的基因插在_________和_________之间。

10、基因表达载体中启动子的本质是_________，它是_________识别和_______的位点，其功能是_________________；标记基因的作用是___________________________。

11、目的基因进入受体细胞内维持稳定和表达的过程称为_________。

12、将目的基因导入植物细胞最常用的方法是_________。构建基因表达载体时要将目的基因插入到_______________中，然后利用土壤农杆菌的_________作用，使目的基因插入到植物细胞的_________上。

13、将目的基因导入到动物细胞中最常用的方法是_________。首先要将目的基因表达载体_________，然后再从雌性动物体内取出受精卵进行_________，经过_________一段时间后再移植到雌性动物的输卵管或子宫内，使其发育成为转基因动物。之所以用动物的受精卵作为受体细胞是因为__________________。

14、基因工程中常用大肠杆菌等原核生物作为受体细胞，其原因是原核生物______________

_________。大肠杆菌细胞最常用的转化方法是首先用_________处理细胞，使细胞处于_________，然后将基因表达载体溶于缓冲液中与之混合，在一定的温度条件下促进细胞吸收DNA分子。

15、目的基因能否在受体细胞中稳定遗传的关键是___________________________，检测的方法是采用_________技术，把含有目的基因的DNA片段用_________等作上标记，以此作为探针，然后与转基因生物的基因组DNA分子进行杂交。杂交前要将转基因生物的基因组DNA分子加热使其________。该技术的原理是_________。

16、检测目的基因是否发挥功能的第一步是要检测___________________________，检测方法是_________，用标记的目的基因作________与转基因生物中提取的mRNA杂交，如果_________________，则表明目的基因转录出了mRNA。如果要检测目的基因是否表达成功，则要用_________技术。最终要确定转基因生物是否成功还要进行_________水平的鉴定。例如，一个抗虫的目的基因导入植物细胞后，是否赋予了植物抗虫特性，检测的方法是___________________________。

17、培育转基因动物最重要的用途之一从转基因动物的乳汁中获取重要的酶、激素等医药产品，这样的动物称为________________。构建基因表达载体时需要将目的基因的前端加上

________________。

18、体外基因治疗都是先__________________进行培养，然后在体外完成基因转移，再筛选成功转移了目的基因的细胞进行_________最后重新输入患者体内。体内基因治疗往往用_________作载体。

19、蛋白质工程的直接操作对象是_________，这是因为__________________。它的基本途径是：从_________出发，再设计出__________________，然后推出__________________，再找到相应的__________________。蛋白质工程是以蛋白质分子的结构规律及其与_________________作为基础，通过_________________对现有蛋白质进行改造或者制造一种新的蛋白质。

答案：

1体外D NA重组  转基因 重组

2性内切酶（简称酶） 连接酶 载体

3原核生物 双链DNA分子 磷酸二酯键 黏性末端 平末端

4、E.coliDNA连接酶 连接酶

5、DNA分子 自我复制 有一至多个酶切割位点 有特殊的标记基因  动植物病毒、γ-噬菌体衍生物

6、获取目的基因 构建基因表达载体  将目的基因导入受体细胞  目的基因的检测与鉴定

7、从基因文库中提取 化学方法人工合成

8、多聚酶链式反应 双链复制 要有一段已知目的基因的核苷酸序列 热稳定的DNA聚合酶

9、构建基因表达载体  使目的基因在受体细胞中稳定的存在复制遗传和表达发挥作用

目的基因不能在受体细胞内稳定的存在复制遗传和表达发挥作用 启动子 终止子  

标记基因 启动子 终止子

10、一段DNA片段 聚合酶 结合 驱动基因转录出mRNA  

鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来

11、转化

12、农杆菌转化法 土壤农杆菌Ti质粒的T-DNA中 转化 染色体DNA

13、显微注射法 提纯 显微注射 胚胎早期培养 受精卵细胞全能性高，能发育成完整的个体

14、繁殖快，多为单细胞、遗传物质相对较少      Ca+     感受态

15、目的基因是否插入到转基因生物的（染色体DNA）DNA分子上 分子杂交

放射性同位素 解旋成单链 碱基互补配对

16、目的基因是否转录出了m分子杂交 探针 显示出杂交带

 抗原--抗体杂交 个体生物学 让虫子去吃转基因植物，看虫子的发育是否明显不正常或存活率是否明显降低

17、乳腺（乳房）生物反应器 乳腺蛋白基因的启动子

18、从病人体内获得某种细胞 细胞扩增（细胞培养） （对人体无害的）病毒

19、基因 基因决定蛋白质 预期的蛋白质功能 预期的蛋白质结构

蛋白质的氨基酸序列 相对应的脱氧核苷酸序列 生物功能的关系

基因修饰或基因合成