玻璃化冷冻操作说明

1、冷冻载架和载杆做好标记

2、试剂从冰箱内拿出后室温平衡半小时使用。

3、用移液加70-100ul BS、ES、VS液体各一滴。

4、吸胚胎与BS中轻轻洗涤3-5次，转移到ES中。

5、胚胎在ES中1-2分钟，让胚胎自由沉到液滴底部。

6、轻轻转移胚胎的位置2次。

7、胚胎在ES中5分钟后，吸胚胎到VS中。

8、胚胎在VS中15-20秒后，吸胚胎轻轻吹吸5次左右，轻轻的将胚胎放在载杆上，至于液氮中，从胚胎置于VS的时间到置于液氮中，时间控制在1分钟左右，不超过1分半钟。

玻璃化解冻操作说明

1、解冻1液置于37培养箱中平衡30分钟，解冻2、3、4液室温平衡30分钟。

2、找到解冻胚胎的载杆，甩一下液氮，轻轻但迅速的置于解冻1液中1分钟。

3、胚胎在解冻2液中3分钟，中间不需要移动胚胎。

4、胚胎在解冻3液中3分钟，中间不需要移动胚胎。

5、胚胎在解冻4也中6分钟，中间轻轻转换位置3次。

6、将胚胎轻轻转移到培养液中。