前花青素含量测定方法(UV)

原花青素（Proanthocyanidin）含量测定方法

一、仪器与试剂

1．仪器：UV-2101 PC紫外-可见光分光光度计

2．试剂： 2%NH4Fe(SO4)2·12H2O的2N盐酸水溶液：量取浓盐酸17mL，加水至100mL，加入2gNH4Fe(SO4)2·12H2O，振摇溶解，即得。(两周内有效)

酸性正丁醇溶液：95mL正丁醇中加入5mL浓盐酸，混匀。(当日使用)

二、溶液制备

1．样品溶液制备  精密称取葡萄籽提取物样品约100mg，置50mL容量瓶中，加甲醇溶解定容。精密吸取2mL于50mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，即为供试液。

精密吸取该供试液1mL于10mL具塞试管中，加入2% NH4Fe(SO4)2·12H2O的2N盐酸水溶液0.2mL，酸性正丁醇溶液6mL，拧紧密封盖，摇匀，拧松密封盖。置95℃水浴中加热反应60min，取出，在冰水浴中快速冷却，即得待测样品溶液。

2．标准品溶液制备  以标准样品代替样品，按样品溶液制备方法，处理即得标准品溶液。

3．样品空白溶液制备  以甲醇代替样品供试液，按样品溶液处理，即得空白溶液。

三、样品测定

打开仪器电源，预热20min，待仪器自检通过后，在546nm处以样品空白溶液作为空白，测定标准品溶液和样品溶液吸收度。

四、结果计算                       

               A×Ws

        C%=           ×S 

               As×W

As、A：标准样品、样品吸收值

Ws、W：标准样品、样品称样量（mg）

S：标准样品含量（%）

注：所用器皿均需干燥处理。除甲醇外，其余均需平行显色三份。