HPLC法测定复方咪康唑软膏中咪康唑和丙酸氯倍他索的含量

谢子立　武　谷

(安徽省药品检验所,合肥　230061)

摘要　目的　用HPLC法测定复方咪康唑复方软膏中咪康唑和丙酸氯倍他索的含量。方法　以ODS为固定相, 0135%磷酸溶液(用三乙胺调节p H→312±011)2甲醇(20∶80)为流动相,检测波长为240nm,流速为110ml・min-1;黄体酮为内标。结果　咪康唑、丙酸氯倍他索的浓度线性范围分别为0116～116g・L-1和01004～0104g・L-1,回收率分别为9911%和10010%。结论　本法操作简便,结果准确,可以有效地控制质量。

关键词　咪康唑;丙酸氯倍他索;HPLC

　　复方咪康唑软膏是由咪康唑、丙酸氯倍他索以及适量的基质配制成的一种复方制剂,是用于治疗皮肤病的外用药。现有的各省地方药品标准〔1,2〕对咪康唑、丙酸氯倍他索的含量测定一般分别采用的是容量法和分光光度法,操作过程烦琐、费时。本文采用HPLC法,可以同时测定这两种成分的含量。实验表明:本法简便、快速,结果准确。

1　仪器及试药

岛津LC210As高效液相色谱仪,SPD210A检测器,C2R7Ae plus处理机。

咪康唑(21329401)、丙酸氯倍他索(103022 9901)及黄体酮(002729505)对照品均由中国药品生物制品检定所提供,复方咪康唑软膏及基质均由安徽省陇海制药厂提供。

甲醇为色谱纯,磷酸、三乙胺均为分析纯,水为重蒸馏水。

2　色谱条件

色谱柱:Shim2pack CLC2ODS(150×416mm),流动相:0135%磷酸溶液(用三乙胺调节p H→312±011)2甲醇(20∶80);流速110ml・min-1;检测波长240nm;进样量:20μl;理论板数按咪康唑峰计算应不低于2500,相邻色谱峰之间的分离度应不低于115;温度为室温。在上述色谱条件下,咪康唑、丙酸氯倍他索及内标的色谱图见图1。

3　溶液的配制

311　内标溶液的配制　称取黄体酮适量,加甲醇制成每1ml含014mg溶液。

312　对照品溶液的配制　取咪康唑800mg,丙酸氯倍他索20mg,精密称定,置200ml量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度。

4　测定结果

411　线性关系　精密量取对照品溶液110、310、510、710、1010ml,分别置于25ml量瓶中,精密加入内标溶液310ml,加甲醇稀释至刻度,摇匀。按上述色谱条件分别进样20μl,记录色谱图,以对照品与内标的峰面积比为纵坐标,对照品浓度(mg・ml-1)为横坐标,进行回归分析。结果表明:咪康唑、丙酸氯倍他索的线性范围分别为0116～116g ・L-1和01004～0104g・L-1,回归方程分别为: Y=0104479+11912X,r=0199

Y=-31061×10-3+13193X,r=019998

412　精密度试验　精密吸取对照品溶液1010ml 及内标溶液310ml,置50ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,取该溶液连续进行6次,每次进样20μl,测得咪康唑、丙酸氯倍他索与内标物的色谱峰面积比值的RSD分别为113%和0126%。

413　回收率试验　称取空白基质2g,置50ml量瓶中,精密加入对照品溶液1010ml,加甲醇适量,置70℃水浴中,加热使溶解,放冷至室温,精密加入内标溶液310ml,加甲醇稀释至刻度,摇匀,置冰浴中冷却2h,取出后迅速滤过,弃去初滤液,取续滤液20μl注入被液相色谱仪中,记录色谱图。另以“412”项下的溶液为对照品溶液,同法测定,按内标法以峰面积计算,即得。咪康唑、丙酸氯倍他索的回收率分别为9911%和10010%,RSD分别为0192%和0183%(n=5)。

414　干扰试验　称取空白基质2g,加甲醇适量,在70℃水浴中加热使基质熔化,充分振摇,放冷后加甲醇稀释至50ml,置冰浴中冷却2h,取出后迅速滤过,弃去初滤液,取续滤液20μl注入液相色谱仪中,记录色谱图(见图2),在与供试品主峰保留时间相同处无色谱峰出现。结论:基质对含量测定无干扰。

415　样品测定　取样品2g,精密称定,置50ml量

・

9

6

・

安　徽　医　药　A nhui Medical and Pharm aceutical Journal　2001Mar;5(1)

图1　对照品　　　　　　　　　　　　　　图2　空白基质　　　　　　　　　　　　　　图3　样品

11;21丙酸氯倍他索;31黄体酮;41咪康唑

表1　样品测定结果(标示量%,n =3)

批号

咪康唑含量

丙酸氯倍他索含量

00010195.8(0.9)

94.1(0.6)00010296.3(1.2)95.1(0.5)000103

104.7(0.7)

99.2(0.5)

　　注:括号内为RSD (%)值,样品由安徽省陇海制药厂提供

瓶中,照回收率试验项下的方法操作,测定结果见表1,色谱图见图3。5　讨论

511　检测波长的选择　咪康唑和丙酸氯倍他索的UV 图中(以甲醇为溶剂),最大吸收波长分别

为2nm (离239nm 较近的一波长)和239nm ,参照中国药典2000年版二部〔3〕,考虑到样品中丙酸氯

倍他索的含量较低,并根据实验结果,选择240nm 为检测波长,使2成分的色谱峰相匹配,且吸收值最

为稳定。512　磷酸溶液pH 值的选择　p H 值的不同,对咪康唑的保留时间及峰形影响较大,当p H 值增大时,咪康唑保留时间缩短并有些拖尾,各组分的分离度下降;而丙酸氯倍他索的峰形较好、保留时间较短,基本不受p H 的影响。实验证明p H 312时,效果最佳。

参考文献

1　安徽省药品标准(皖Q/WS 249292)2　上海市药品标准,1993:1903　中国药典,2000;二部:103,845

Determination of miconazole nitrate and clobetasol propionate

in compound miconazole nitrate ointment by HPLC

XIE Zi 2Li ,WU Gu

(A nhui Instit ute f or D rug Cont rol ,Hef ei 　230061)

ABSTRACT 　AIM 　Miconazole nitrate and clobeta 2sol propionate were determined by HPLC in com 2pound miconazole nitrate ointment.METH ODS 　

Shin 2pack CLC 2ODS (150×416mm ,5μm ),0135%phosphoric acid solution (adjusted with triethylamin to p H 312±011)2methanol (20∶80)as mobile phase ,progesterone as internal standard ,flow rate was 110ml ・min -1,wavelength of detector was 240nm.RE 2SU LTS 　The calibration curves were linear in the range of 0116～116g ・L -1for miconazole nitrate and

01004～0104g ・L -1for clobetasol propionate.The

average recoveries (n =5)of miconazole nitrate and clobetasol propionate were 9911%(RSD =0192%)and 10010%(RSD =0183%),respectively.CON 2C L USION 　This method is simple and convenient in work.It is accurate and very suit for the quality con 2trol.

KEY WORDS 　miconazole nitrate ;clobetasol propi 2onate ;HPLC

・07・安　徽　医　药　A nhui Medical and Pharm aceutical Journal 　2001Mar ;5(1)