
对全新结构的药物或中草药复方,先通过小批量动物的摸索,找出0%和100%估计致死量(即Dmin和Dmax),再求出i值。
(1)用10倍稀释的药物浓度系列,用少量动物(每组2~3只),找出大致死亡范围。如:
| 剂量(mg/kg) | 5 | 50 | 500 | 5000 |
| 死亡/总数 | 0/2 | 1/2 | 2/2 | 2/2 |
(2)再用1、2、4、8……等2倍稀释的药物浓度系列,每组4只,找出Dmin和Dmax。如:
| 剂量(mg/kg) | 50 | 100 | 200 | 400 | 800 |
| 死亡/总数 | 0/4 | 2/4 | 2/4 | 4/4 | 4/4 |
Dmax=400×70%×2=560 mg/kg
Dmin:当出现0/4死亡时,如其后一组为1/4死亡,则取0/4组的剂量为Dmin;如后一组大于1/4,考虑到0/4组的剂量在正式实验中可能的死亡率高于70%,为慎重起见,可将0/4组的剂量除以2作为Dmin。
Dmin=50÷70%÷2≈35 mg/kg
(3)本法用较少的动物和药物,寻找出正式实验时最高死亡率不低于70%,最低死亡率不高于30%点剂量范围在确定了Dmax和Dmin以后,可求得组间距(i值):
| i= | lg Dmax-lgDmin |
| n-1 |
注意:① LD50测定中剂量组数的设计,除符合统计学要求外,还应根据预试验所提供的药物的毒性情况而定。②一般而言,在实际工作中,设4~5个剂量组,组距以0.65~0.85为宜。③小鼠每组10只(雌雄各半),大鼠不应少于6~8只。
