柱层析怎样加洗脱剂

湿法装柱：这是最常用的方法，将固定相与洗脱剂活成匀浆后倒入柱子中，不断敲打使固定相密实均匀无气泡。加压装柱可以高效地装好柱子且避免气泡产生。干法装柱：将干燥的吸附剂直接加入空柱子中，用油泵抽柱子底部减压装柱。但需注意固定相要添加结实，并用较多溶剂“走柱子”直到柱子下端不再发烫，恢复到室温后再撤去压力。上样的

色谱柱是生物分离过程中最重要的设备之一。使用色谱柱时，应遵循以下步骤：1. 准备好所有所需的试剂和设备，包括色谱柱、流动相、缓冲液、样品等。2. 将色谱柱插入柱箱中，确保接口处无泄漏。3. 打开泵，将流动相注入色谱柱中，并记录流速。4. 待流动相充满色谱柱后，将缓冲液加入柱子中，然后进行洗脱。5. 根据实验要求，逐渐改变流速和缓冲液的组成，以便更好地分离样品中的组分。6. 在分离过程中，应定期检查色谱柱的性能，如峰形、分离效果等。7. 分离完成后，关闭泵和色谱柱，将剩余的流动相和缓冲液倒出。8. 清洗色谱柱，并将其储存于干燥、阴…上海鲲霆生物科技有限公司深耕生物医药行业多年，自创立之初就以为生物医药企业提供从研发分析到工业生产的整体化服务为愿景。不断钻研色谱分析及制备技术，提升服务品质，致力于成为值得信赖的色谱技术服务提供商。鲲霆生物现为Nouryon旗下品牌...

你最好在用10:1和5：1的爬下板子，选择一种比例，让杂质在0.3左右，而产品基本爬不起来，就用比这个比例极性稍小的比例来过。接的试管要换勤一点。

用滴管取几毫升石油醚，沿柱壁洗下色素，并通过放出溶剂至柱顶刚流干，从而使色素吸附在柱上。然后加大量的石油醚洗脱。黄色的B-胡萝卜素在柱中移动较快，红色的番茄红素移动较慢。收集洗脱液至黄色的B-胡萝卜素从柱上完全除去，然后用极性较大的氯仿作洗脱剂洗脱番茄红素（注意更换接收瓶）。将...

装柱：将柱底用棉花塞紧，不必用海沙，加入约1/3体积石油醚（氯仿），装上蓄液球，打开柱下活塞，将匀浆一次倾入蓄液球内。随着沉降，会有一些硅胶沾在蓄液球内，用石油醚（氯仿）将其冲入柱中。上样：干法湿法都可以。海沙是没必要的。上样后，加入一些洗脱剂，再将一团脱脂棉塞至接近硅胶表...

装柱前，先将载体和固定液混合，然后分次移入色谱柱中并用带有平面的玻棒压紧；供试品可溶于固定液，混以少量载体，加在预制好的色谱柱上端。洗脱剂需先加固定液混合使之饱和，以避免洗脱过程中两相分配的改变。样品在色谱柱中的移动速度和分离效果取决于吸附剂对样品各组分的吸附能力大小和洗脱剂对...

上样可通过干法或湿法进行，无需海沙。上样后，加入少量洗脱剂，用脱脂棉封住顶部。然后可逐渐加入大量洗脱剂，避免损坏硅胶表面。柱层析的关键在于洗脱强度的控制，推荐使用梯度洗脱。例如，10mg样品用1g硅胶H，每0.5ml收集一馏分；1-2g样品用50g硅胶，每20-50ml收集一馏分。检测时，尽量使用专用喷显剂...

硅胶柱层析惯用方法 1.称量。200-300目硅胶，称30-70倍于上样量；如果极难分，也可以用100倍量的硅胶H。干硅胶的视密度在0.4左右，所以要称40g硅胶，用烧杯量100ml也可以。2.搅成匀浆。加入干硅胶体积一倍的溶剂用玻璃棒充分搅拌。如果洗脱剂是石油醚/乙酸乙酯/丙酮体系，就用石油醚拌；如果洗脱...

并通过双联球或气泵加压，直至流速恒定。4. 上样：加入适量的洗脱剂，将一团脱脂棉塞至接近硅胶表面以防止溶液流过快。5. 过柱和收集：使用梯度洗涤液进行淋洗，并通过检测（如使用专用喷显剂）来监控产品收集。6. 送谱：收集到的产品经过旋转干燥后，在进行质谱分析前通常需要进行重结晶处理。

在进行硅胶柱层析时，采用氯仿-甲醇-水作为洗脱剂，具体的比例需要根据薄层层析（TLC）的结果来确定。首先，通过TLC检查不同比例下的洗脱效果，确保能准确分离皂苷。随后，将选定的最佳洗脱条件应用于硅胶柱层析，以获得较为纯净的皂苷成分。在硅胶柱层析之后，还可以结合制备型高效液相色谱（HPLC）进行进一步...

最后进行产品检测与送谱。使用专用喷显剂进行检测，确保分离效果。收集到的产品需进行旋干处理，并在送谱前进行重结晶纯化，以提高产品的纯度和质量。在整个硅胶柱层析过程中，需严格控制实验条件，包括硅胶的目数、溶剂的选择、洗脱剂的种类和浓度等，以确保分离效果和产品的纯度。